抗猪甲型犎1荦1流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体的 - 畜牧兽医学报.pdf

畜牧兽医学报 ， （）： ２０１１４２５ ７１１７１６ 　 犃犮狋犪犞犲狋犲狉犻狀犪狉犻犪犲狋犣狅狅狋犲犮犺狀犻犮犪犛犻狀犻犮犪 抗猪甲型犎１犖１流感病毒血凝素蛋白单克隆 抗体的制备与特性分析 张 健，陈 艳，乔传玲，杨焕良，唐 续，辛晓光，陈化兰 　 　 　 （中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室 农业部动物流感 重点开放实验室，哈尔滨 １５０００１） 摘 要：本研究旨在制备猪甲型 流感病毒血凝素（ ）蛋白的特异性单克隆抗体。采用 方法扩增 Ｈ１Ｎ１ ＨＡ ＲＴＰＣＲ 　 猪甲型 Ｈ１Ｎ１流感病毒的 犎犃基因，将其克隆至真核表达载体 ｐＣＡＧＧＳ上，获得重组质粒 ｐＣＡＧＧＳＨＡ，转染 细胞，通过间接免疫荧光 （ ）检测表 明 蛋 白在 细胞 中得到表达。将 以 ２９３Ｔ ＩＦＡ ＨＡ ２９３Ｔ ｐＣＡＧＧＳＨＡ １ ·只 剂量免疫 周龄 ／小鼠，获得 株稳定分泌抗 蛋白单克隆抗体（ ）的杂交瘤细胞株，分 １００μｇ ５ ＢＡＬＢｃ ４ ＨＡ ＭＡｂ 别命名为 、 、 和 。其中 诱导小鼠产生的腹水 效价为 ，中和效价为 ， １１Ｇ７３Ｃ１０３Ｇ３ ２Ｂ１１ １１Ｇ７ ＨＩ １４ｌｏ２ １∶８１９２ＨＩ ｇ 试验结果进一步表明 只与甲型 流感病毒发生反应，而不与其他 、 、 、 及 １１Ｇ７ Ｈ１Ｎ１ Ｈ１Ｎ１Ｈ１Ｎ２Ｈ３Ｎ２Ｈ５Ｎ１ Ｈ９Ｎ２ 亚型流感病毒反应。该 ＭＡｂ的制备将为建立猪甲型 Ｈ１Ｎ１流感病毒与传统亚型 ＳＩＶ的鉴别诊断方法奠定基础。 关键词：甲型 猪流感病毒； ； Ｈ１Ｎ１ ＨＡ ＭＡｂ 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Ｓ８５２．６５９．５ Ａ ０３６６６９６４２０１１０５０７１１０６ 　　　　 　　　　 犘狉犲犪狉犪狋犻狅狀犪狀犱犆犺犪狉犪犮狋犲狉犻狕犪狋犻狅狀狅犳犕狅狀狅犮犾狅狀犪犾犃狀狋犻犫狅犱 犃犪犻狀狊狋犎犲犿犪 犾狌狋犻狀犻狀 狆 狔 犵 犵犵 犘狉狅狋犲犻狀狅犳２００９犛狋狉犪犻狀狅犳犎１犖１犛狑犻狀犲犐狀犳犾狌犲狀狕犪犞犻狉狌狊 ， ， ， ， ， ＺＨＡＮＧＪｉａｎ ＣＨＥＮＹａｎ ＱＩＡＯＣｈｕａｎｌｉｎ ＹＡＮＧＨｕａｎｌｉａｎ ＴＡＮＧＸｕ ｇ ｇ ， ＸＩＮＸｉａｏｕ