翘嘴鳜nadph 氧化酶三个调节亚基cdna 的克隆及表达特征.pdf

动 物 学 研 究 2010，Jun. 31(3) ：250−260 CN 53-1040/Q ISSN 0254-5853 Zoological Research DOI ：10.3724/SP.J.1141.2010.03250 翘嘴鳜 NADPH 氧化酶三个调节亚基 cDNA 的克隆及表达特征 1 2 1,* 胡宝庆 ，刘 毅 ，文春根 （1. 南昌大学 生命科学学院，江西 南昌 330031 ；2. 江西师范大学 生命科学学院，江西 南昌 330022 ） 摘要：吞噬细胞NADPH氧化酶能生成用于清除病原微生物的活性氧簇 (reactive oxygen species, ROS) ，在机 体的防御体系中起着非常重要的作用。该文利用RT-PCR 结合RACE-PCR 的方法，对翘嘴鳜 (Siniperca chuatsi) NADPH氧化酶的 3 个调节亚基p40phox 、p47phox和p67phox 的cDNA进行了克隆。结果显示p40phox基因cDNA序 列全长为1406 nt ，开放阅读框长度为1 050 nt，翻译成349 个氨基酸；p47phox 基因cDNA序列全长为1 686 nt， 开放阅读框为1209 nt ，翻译成402 个氨基酸；p67phox基因cDNA序列全长为2 185 nt ，开放阅读框长度为1488 nt ， 翻译成495 个氨基酸。半定量PCR分析显示在翘嘴鳜血液、脑、鳃、性腺、心脏、头肾、肠、肾、肝、脾、胸腺 组织中都能检测到这3 个亚基的mRNA表达，然而，它们在不同组织中的表达强度具有差异。经柱状黄杆菌灭活 苗FKG4免疫后，p40phox亚基mRNA在翘嘴鳜血液和头肾中的表达量显著上升，p47phox在头肾和脾脏中的表达量 显著上升，而p67phox在血液、头肾和脾脏中的表达量均显著上升。由此推断NADPH氧化酶参与了翘嘴鳜机体的 抗菌免疫应答。 关键词：翘嘴鳜；NADPH 氧化酶；分子克隆；柱状黄杆菌 中图分类号：Q78; Q959.483 ； Q959.483.06 文献标志码：A 文章编号：0254-5853-(2010)03-0250-11 cDNA Cloning and Expression Characterization of Three Regulatory Subunits of NADPH Oxidase Within Cytoplasm from Mandarin Fish, Siniperca chuatsi 1 2 1,* HU Bao-Qing , LIU Yi , WEN Chun-Gen (1. College of Life Sciences, Nanchang University, Nanchang 330031, China; 2. College of Life Sciences, Jiangxi Normal University, Nanchang 330022, China)