重组人透明质酸酶3种活性测定方法的比较 - 食品与药品.pdf

食品与药品 Food and Drug 2011年第 13卷第01期 5 重组人透明质酸酶3种活性测定方法的比较 1 2 2 2 1, 2* 1, 2 王晓玉 ，刘 飞 ，张 莉 ，朱希强 ，凌沛学 ，张天民 （1.山东大学药学院，山东 济南 250012; 2. 山东省药学科学院，山东 济南 250101） 摘 要：目的 采用不同的检测方法测定重组人透明质酸酶活性，以确定不同条件下最适宜的检测方法。方法 采用3,5-二 硝基水杨酸法、对-二甲氨基苯甲醛法、浊度法测定重组毕赤酵母发酵上清液和凝胶过滤分离产物中透明质酸酶活性，并 分析比较其结果。结果 3,5-二硝基水杨酸法与对-二甲氨基苯甲醛法的线性范围分别是50～450 U/mL ，50～350 U/mL 。浊 度法的线性范围较小，为0～10 U/mL 。3种方法的RSD值分别是2.71 %，11.71 %，0.65 % 。结论 发酵上清液中的透明质酸 酶适合用3,5-二硝基水杨酸法测定，凝胶过滤产物用浊度法测定效果良好。 关键词：重组人透明质酸酶；3,5-二硝基水杨酸；对-二甲氨基苯甲醛；浊度法；活性；测定 中图分类号：R978.7 文献标识码：A 文章编号：1672-979X （2011）01-0005-04 Comparison of Three Methods for Activity Assay of Recombinant Human Hyaluronidase 1 2 2 2 1,2 WANG Xiao-yu , LIU Fei , ZHANG Li , ZHU Xi-qiang , LING Pei-xue , ZHANG Tian-min1,2 (1.School of Pharmaceutical Sciences, Shandong University, Jinan 250012, China; 2.Shandong Academy of Pharmaceutical Sciences, Jinan 250101, China) Abstract: Objective To detect the activity of recombinant human hyaluronidase by different methods and determine the optimal methods for activity assay of recombinant human hyaluronidase under different conditions. Methods 3,5- Dinitrosalicylic acid(DNS), p -dimethylaminobenzaldehyde(DMAB) and turbidimetry methods were used to measure the activity of hyaluronidase from Pichia pastoris fermentation supernatant and gel filtration products, and the results were analyzed. Results The linear ranges of DNS, DMAB and turbidimetry methods were 50-450 U/mL, 50-350 U/ mL and 0-10 U/mL, respectively. The