犕犪狉犮 145细胞犆犇151蛋白主要抗原表位区的 - 畜牧兽医学报.pdf

畜牧兽医学报 ， （）： ２０１２４３３ ４１０４１５ 　 犃犮狋犪犞犲狋犲狉犻狀犪狉犻犪犲狋犣狅狅狋犲犮犺狀犻犮犪犛犻狀犻犮犪 犕犪狉犮１４５细胞犆犇１５１蛋白主要抗原表位区的表达 及其与猪繁殖与呼吸综合征病毒感染关系的研究 １ １ １ １ １ ２ 肖一红 ，王伟伟 ，张 璐 ，高继明 ，马晓春 ，周恩民 　 （ 山东农业大学动物医学院，泰安 ； 西北农林科技大学兽医免疫学研究所， １． ２７１０１８２． 西北农林科技大学动物医学院，杨凌 ７１２１００） 摘 要：为研究 与猪繁殖与呼吸综合征病毒（ ）感染的关系，根据 中已发表的 蛋白 ＣＤ１５１ ＰＲＲＳＶ ＧｅｎＢａｎｋ ＣＤ１５１ 　 的基因序列设计并合成一对特异性引物，从 细胞中扩增出 的 基因片段并克隆入 Ｍａｒｃ１４５ ２９４ｂ 犆犇１５１ ＧＥＸ４Ｔ ｐ ｐ 载体，转化入大肠杆菌用 进行诱导表达，经 和 对表达产物进行鉴定。表达蛋白纯 ３ ＩＰＴＧ ＳＤＳＰＡＧＥ Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ 化后用于免疫小鼠制备抗 蛋白血清，用 和 检测抗血清的效价及特异性。将抗 蛋白血清 ＣＤ１５１ ＥＬＩＳＡ ＩＦＡ ＣＤ１５１ 与 Ｍａｒｃ１４５细胞孵育后再感染 ＰＲＲＳＶ，观察细胞 ＣＰＥ验证该血清对 ＰＲＲＳＶ的阻断效果。结果表明成功构建了 ｐＧＥＸ４Ｔ３ＣＤ１５１，获得了相对分子质量为 ３７ｋｕ的重组 ＣＤ１５１蛋白。制备的抗血清特异性结合 Ｍａｒｃ１４５细胞并 有效阻断 感染 细胞。这些研究结果为进一步阐明 与 感染的关系提供一定的理 ＰＲＲＳＶ Ｍａｒｃ１４５ ＣＤ１５１ ＰＲＲＳＶ 论基础。 关键词： ； 细胞； ；阻断 ＣＤ１５１Ｍａｒｃ１４５ ＰＲＲＳＶ 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Ｓ８５２．６５９．２ Ａ ０３６６６９６４２０１２０３０４１００６ 　　　　 　　　　 犈狓狉犲狊狊犻狅狀狅犳犕犪犻狀犈犻狋狅犲犇狅犿犪犻狀狊狅犳犆犇１５１犳狉狅犿犕犪狉犮１４５犆犲犾犾狊犪狀犱犚犲犾犪狋犻狅狀狊犺犻 狆 狆 狆 狆 狑犻狋犺犐狀犳犲犮狋犻狅狀狅犳犘狅狉犮犻狀犲犚犲狉狅犱狌犮狋犻狏犲犪狀犱犚犲狊犻狉犪狋狅狉犛狀犱狉狅犿犲犞犻狉狌狊 狆 狆 狔 狔 １ １ １ １ １