红肉蜜柚汁胞蛋白质双向电泳体系优化研究.pdf

2013,42(3): 193-198. Subtropical Plant Science 红肉蜜柚汁胞蛋白质双向电泳体系优化研究 伍 洋，陈清西 （福建农林大学园艺学院，福建 福州，350002 ） 摘 要：为建立适合红肉蜜柚发育过程中汁胞蛋白质组学的研究体系，以着色初始时期的红肉蜜柚汁胞为试材， 摸索最适合的蛋白质双向电泳体系参数。结果表明，酚提取法比 TCA- 丙酮法更适合于红肉蜜柚汁胞总蛋白质 的提取，提取得率高，双向电泳图谱清晰。采取 18 cm、线性 pH 3 ～10 和 18 cm、线性 pH 4 ～7 相结合的分 析策略，可获得更为完整的蛋白质组信息，其第一向等电聚焦最佳参数（总伏小时数）分别为 30 000 Vhs 和 43 000 Vhs 。 关键词：红肉蜜柚；汁胞；蛋白质组学；双向电泳 Doi: 10.3969/j.issn.1009-7791.2013.03.002 中图分类号：Q945 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2013)03-0 193-06 Optimization of Two-Dimensional Gel Electrophoresis System for Analyzing ‘Hongroumiyou’ Juice Sacs Proteins WU Yang, CHEN Qing-xi （College of Horticulture, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, Fujian China ） Abstract: In order to establish proteomics research system for analyzing ‘Hongroumiyou’ juice sacs proteins, using ‘Hongroumiyou’ juice sacs in initial color change stage as test material, exploring the most suitable 2-DE system parameters. The results indicated that compared with TCA-acetone extraction method, phenol extraction method was more appropriate for ‘Hongroumiyou’ juice sacs total protein yield. Using 18 cm, pH 4 ～7 linner immobiline combined with 18 cm, pH 3 ～10 linner immobiline could had clear and high resolution 2-DE patterns. Both of the best isoelectric focused parameter was 43 000 vhs and 30 000 vhs, respectively. Key words: Citrus grandis ‘Hongroumiyou’; juice sacs; proteomics; two-dimensional electrophoresis 红肉蜜抽Citrus grandis ‘Hongroumiyou ’的果实色泽是决定其商品性的重要因素之一，人们常常将 良好的着色与果实优良的内在品质结合起来，着色越深表明其品质越好。红肉蜜柚因汁胞鲜红，极具 诱惑，因此深受消费者青睐，其市场价格比普通琯溪蜜柚高出2～3 倍。人们为了研究果实着色原因及 色泽发生发展规律，利用颜色突变体品种开展了大量关于果实色泽形成的理论研究，以期为“果实着色 调控”和“果实色泽育种”提供理论依据。 红肉蜜柚虽然是近年来选育认定的新品种，但关于红肉蜜