蜜柚泛素蛋白连接酶ring-h2 finger 基因的克隆与表达分析 - 园艺学报.pdf

园 艺 学 报 2014 ，41 （8 ）：1689 –1698 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 蜜柚泛素蛋白连接酶 RING-H2 finger 基因的克 隆与表达分析 金晓琴，康 振，刘伟娜，潘永娟，王梨嬛，郭卫东，杨 莉* （浙江师范大学化学与生命科学学院，浙江金华 321004 ） 摘 要：在 26S 泛素蛋白酶体途径介导的蛋白质降解过程中，RING finger 蛋白是一类特殊的泛素蛋 白连接酶，参与植物多个生长发育及逆境胁迫响应过程。为探明柚RING finger 家族成员的序列特征及表 达模式，从红肉蜜柚和琯溪蜜柚果实汁胞中分离出两个 RING finger 基因 cDNA 片段（CgRHF1 和 CgRHF2），采用实时荧光定量PCR 研究其在不同组织及果实发育不同时期的表达模式。结果表明，两个 基因均属于 RING-H2 finger 家族成员，且红肉蜜柚与琯溪蜜柚的两个 CgRHF 之间碱基序列均无差异；除 根组织外，CgRHF1 表达水平较 CgRHF2 高，且在红肉蜜柚茎、叶和花中的表达水平显著高于琯溪蜜柚； CgRHF2 在组织及果实发育过程表达水平均较低，但在果实成熟采摘阶段急剧上升。CgRHF1 与 CgRHF2 表达模式的差异暗示这两个基因在柚组织及果实发育进程中行使不同的生物学功能，而非功能互补基因。 关键词：红肉蜜柚；琯溪蜜柚；RING-H2 finger 基因；克隆；基因表达 中图分类号：S 666 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2014 ）08-1689-10 Isolation and Expression Analysis of Two Ubiquitin-protein Ligase RING-H2 Finger Genes from Pommelos [Citrus grandis （L. ）Osbeck] * JIN Xiao-qin，KANG Zhen，LIU Wei-na，PAN Yong-juan，WANG Li-huan ，GUO Wei-dong，and YANG Li （College of Chemistry and Life Science，Zhejiang Normal University ，Jinhua ，Zhejiang 321004 ，China） Abstract ：RING （Real Interesting New Gene ）finger proteins specify the substrates in the 26S ubiquitin-proteasome pathway ，and play important roles in plant development and stress responses. However ，the sequences ，expression characteristics and physiological functions of RING finger genes in pommelo are little known. In this study ，two RING finger （CgRHF1 and CgRHF2 ）cDNA fragments were isolated from Red-fleshed and Guanxi pommelo. The results showed that two CgRHFs were belonged to