tween 80 诱导下米曲霉35232 产胞内脂肪酶的研究.pdf

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2012, Vol.28, No.8 Tween 80诱导下米曲霉3.5232产胞内脂肪酶的研究 刘洪伟，许喜林，李晓凤 （华南理工大学轻工与食品学院，广东广州 510640 ） 摘要：米曲霉3.5232 在Tween 80 诱导下，相比于葡萄糖作为碳源的培养条件，米曲霉在细胞壁、细胞膜及细胞质中均可以诱 导产生分子质量为27 kDa 的脂肪酶，而在细胞质中又有分子质量为36 kDa 的脂肪酶表达。利用硫酸铵沉淀，DEAE Sepahrose Fast Flow 离子色谱交换及Sephadex G-75 凝胶色谱的分离方法，从米曲霉细胞质中分离纯化了分子质量为36 kDa 的脂肪酶。最终纯化倍数为 42.45 ，产率为0.12%。 关键词：米曲霉3.5232；脂肪酶；诱导；分离纯化 文章篇号：1673-9078(2012)8-911-914 Purification of Lipases from Aspergillus oryzae 3.5232 Induced by Tween 80 LIU Hong-wei, XU Xi-lin, LI Xiao-feng (College of Light Industry and Food Sciences, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China) Abstract: The expression of the lipase with 27 kDa molecular weight on cell wall, cell membrane and cytoplasm of Aspergillus oryzae 3.5232 was inducted by Tween 80. Another lipase with 36 kDa molecular weight in cytoplasm was also detected under same conditions. The cytoplasmic lipase was purified to homogeneity by ammonium sulfate precipitaiton and DEAE-Sepharose FF and Sepahdex G-75 column chromatography. Purification fold was 42.5 and the recovery rate was 0.12%. Molecular weight of purified lipase was 36 kDa. Key words: Aspergillus oryzae 3.5232; lipases; induction; isolation and purification 脂肪酶（三酰基甘油酯水解酶 EC3.1.1.3 ）是一 在大多数关于脂肪酶的参考文献中，具有较强水 种能够在油水界面催化三酰甘油酯水解为甘油和游离 解活性的脂肪酶可以由诱导微生物生产，诱导剂一般 脂肪酸的水解酶类。除此之外，脂肪酶还可以催化其 是油类或与油类相关物质[5] 。本实验研究了米曲霉在 它酯类的水解和转酯反应，也可以催化酯化反应、酯 Tween 80 作为碳源时不同细胞组分脂肪酶的诱导产 交换反应、酸水解反应、醇解反应以及氨解反应[1] 。 生情况，分析并对比研究了其不同细胞组分脂肪酶的 高新生物技术已经将脂肪酶用于合成生物多聚体，生 水解活力，并对活力最高的细胞质组分的脂肪酶进行 物柴油以及单一对映异构体高纯度药物，农药以及风 了分离纯化了研究。 味物质[2] 。脂肪