昆虫细胞工程研究进展 - 林业科学研究.pdf

林 业 科 学 研 究　2004 ,17 ( 1) :116 ～ 124 Forest Research ( ) 　　文章编号 2004 昆虫细胞工程研究进展 宋德伟 , 马 　艳 , 冯 　颖 , 陈晓鸣 ( 中国林业科学研究院资源昆虫研究所 ,云南 昆明　650224) 摘要 :综述了从 60 年代首次建立昆虫细胞系以来国内外的昆虫细胞工程的研究进展 。包括昆虫细胞 培养基的研究 , 昆虫细胞系的建立 , 昆虫细胞冻存的研究 , 昆虫细胞培养过程中污染的检测和解决 , 以 ( ) 及昆虫细胞 —杆状病毒表达系统 Baculovirus Expression Vector System ,BEVS 的研究现状和展望 。 关键词 : 昆虫细胞培养 ; 昆虫细胞系 ;污染 ;细胞冻存 ;杆状病毒 中图分类号 :S7187 　　　文献标识码 :A 随着生命科学的迅猛发展 ,在生物工程技术领域中 ,细胞工程已愈来愈受到重视 。以昆虫 细胞为培养对象的昆虫细胞培养技术在现代实验生物学上具有重要的价值 ,广泛地应用于医 ( 药学 、农业及生物学的各个领域 。自从 TDCGrace 在 1962 年首次建立了天蚕蛾 A ntheraea eucalyp ti Scott) 的四个可持续性细胞系[ 1] 以来 , 昆虫细胞培养技术得到了迅速的发展 ,420 余株 来自不同昆虫及组织的细胞系得以建立[2 ] 。目前为了满足科学研究和发展的多方面需要 ,科 学工作者们还在不断致力于新细胞系的建立 。近年来 , 以昆虫杆状病毒为载体 , 以体外培养的 昆虫细胞为受体的基因工程研究取得了突破性的进展 , 昆虫杆状病毒已发展成为基因工程的 一种安全有效的载体 ,可在体外培养的昆虫细胞中高效安全表达外源基因 ,生产出了具有重要 医用价值 ,具备天然活性的生物工程制品 ,从而使昆虫细胞培养倍受青睐 。目前世界上至少有 150 家公司上千个实验室在从事这方面的研究 ,我国的科学工作者已经建立了20 多株昆虫传 [3 ] 代细胞系 ,并利用昆虫细胞 —杆状病毒表达系统成功表达了近 40 种外源蛋白 。昆虫细胞培 养作为一项极具产业化发展潜力的技术 ,正在 日益受到人们的关注 。本文拟对昆虫细胞培养 基 、细胞系建立 、昆虫细胞冻存 、培养过程中遇到的污染以及昆虫细胞 —杆状病毒表达系统的 研究现状及发展趋势作一综合性概述 。 1 　昆虫细胞培养基的研究 体外培养昆虫组织的首创者是 Richard Goldschmiedt ,但他当时没有合适的昆虫细胞培养 基 。Trager 首次研究了培养基中昆虫细胞的生长条件 , 目的是证明单个细胞能在体外存活几 天 ,并利用昆虫组织培养基研究昆虫和哺乳动物病毒[4 ] 。1956 年 ,Silver Wyatt 大大改进了用于 ( ) 家蚕 B ombyx mori Linnaeus 蛹的培养基 ,成功地使卵巢细胞存活了 14 d 。他的培养基含有浓 收稿 日期 : ( ) 基金项 目: 国家林业局 948 项 目“昆虫细胞系及细胞系库建立技术引进”200252 ( ) 作者简介 : 宋德伟 1976 — ,男 , 山东平度人 ,硕士研究生. 通讯作者 ,Email :y