中药及其制剂中化学成分的含量测定.ppt

第十五章中药及其制剂分析概论 1 2 3 4 中药及其制剂分析概述 中药的鉴别 中药的检查内容与方法 中药的化学成分定量与轮廓分析 1 2 中药及其制剂的化学成分含量测定 中药及其制剂的化学成分轮廓分析 一、中药及其制剂中化学成分的含量测定 (一) 指标成分的选择原则 中(西)药复方: 首选君药及贵重药 / 化学药品 ——无法测定时, 依次选择臣或其他药味 有毒药味: 毒性成分含量范围 / 限度检查 ——马钱子碱(马钱子); 乌头碱(川乌) 测定成分: 与功能主治相近 ——山楂: 有机酸(消食健胃); 黄酮(治疗心血管疾病) 一、中药及其制剂中化学成分的含量测定 (一) 指标成分的选择原则 测定成分: 应与工艺相适应 ——何首乌: 二苯乙烯苷类(水煎煮); 大黄酸(醇提取) 测定成分: 应归属某一单味药 ——同含黄连与黄柏: 不宜选择小檗碱定量 无法进行化学成分定量: 测定药物总固体量 ——醚浸出物(挥发油); 正丁醇浸出物(皂苷类) 高效液相色谱法 多采用RP-HPLC 酸碱性化合物的流动相系统 黄酮, 酚类(弱酸) ——乙腈-水-醋/甲酸 皂苷类——乙腈-水 生物碱(强碱)——离子对 梯度洗脱波长梯度 (二) 含量测定的主要方法 气相色谱法 主要用于测定挥发油及其他挥发性组分的含量 ——冰片中的龙脑(≥55%); 丁香中丁香酚(≥11.0%) 内标法, 外标法, 归一化法等 薄层色谱法 薄层吸收扫描法薄层荧光 扫描法 测定方法: 反射法透射法 少秒方法: 直线式扫描锯齿状扫描 定量方法: 主要采用外标法定量 (二) 含量测定的主要方法 其他方法 分光光度法 化学分析法 高效毛细管电泳法 电化学方法 (三) 中药及其制剂多指标成分的含量测定 中药及其制剂中含有众多成分, 仅以单一成分作为质量控制的指标不能全面反映药材质量 对照品对照法 多指标成分 多指标对照品不易获得 同单一成分测定 梯度洗脱 各待测成分获得良好分离 一测多评(内参照加校正因子) 各成分线性良好 各成分相对校正因子稳定 二至丸(女贞子, 墨旱莲) 红景天苷, 女贞子苷, 蟛蜞菊内脂 黄连——同时测定5成分 小檗碱(内参照), 巴马汀, 黄连碱, 表小檗碱, 药根碱 指纹图谱与特征图谱: 中药材, 饮片, 提取物或中药制剂经适当处理后, 采取一定的分析技术获得的能够标示其化学的, 生物学的或其他特征的图谱 ChP2010 指纹图谱——2个注射剂, 4个固体口服制剂, 5个提取物 特征图谱——8个固体口服制剂, 10个提取物) 研究意义: 指纹图谱进行轮廓分析, 表征中药成分的整体性 理想的指纹图谱包含中药的所有成分, 具有定性与定量意义, 它是在鉴别与含量测定的补充 有利于控制中间体与成品的一致性, 减少批间差异 二、中药及其制剂中化学成分的轮廓分析 (一) 中药指纹图谱的类别和特点 按测定手段分类 中药化学指纹图谱 采用光谱, 色谱或其他方法建立的用以表征中药化学成分特征的指纹图谱 中药生物指纹图谱——表征生物学特*征 中药DNA指纹图谱 中药基因组学指纹图谱 中药蛋白组学指纹图谱 按应用对象 分类 中药材指纹图谱 中药原料药(饮片, 配伍颗粒)指纹图谱 生产工艺过程中间产物指纹图谱 中药制剂指纹图谱 (二) 中药指纹图谱研究过程与技术要求 1. 确定研究对象 2. 采/收集样品 3. 制备供试品 5. 方法建立与验证 4. 确定参照物 调研: 文献, 新药申报资料(质量和工艺部分)等 找出分析检测目标 真实性——采集 代表性 ——10批不同产地 确保信息的完整性 指纹图谱包含尽可能多的成分(色谱峰) 优先考虑色谱方法 进行系统的方法学验证(色谱柱, 流动相: T≤1h; 相对A和RT≤3%) 内参照物: 供试品中某一特征化合物(RT适中,相对含量稳定) 外参照物 6. 特征参数要求 共有峰的确认 共有峰面积 非共有峰面积 特征图谱 相似度评价 (二) 中药指纹图谱研究过程与技术要求 6. 特征参数要求 共有峰面积 中药材 单峰面积(占总面积)≥20%, 与共有模式的差值≤±20% 20%＞单峰面积≥10%, 差值≤±25% 注射液/有效部位/中间体 单峰面积(占总面积)≥20%, 与共有模式的差值≤±20% 20%＞单峰面积≥10%, 差值≤±25% 10%＞单峰面积≥ 5%, 差值≤±30% 非共有峰面积 中药材≤10% 注射液≤5% 特征图谱 相似度评价