重组杂合蛛丝蛋白mispnt-pysprp-mispct 的二级结构表征.pdf

ISSN 1007-7626 中国生物化学与分子生物学报 http :/ /cjbmb． bjmu． edu． cn 2016 8 年 月 910 ～ 918 CN 11-3870 /Q Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology 32 (8): DOI :10. 13865 /j． cnki． cjbmb． 2016. 08. 09 重组杂合蛛丝蛋白MiSpNT-PySpＲp-MiSpCT 的二级结构表征 * ， ， 吴忠笏 温 睿 孟 清 ( ， 201620) 东华大学生物科学与技术研究所 上海 摘 ， ， 要 重组蛛丝纤维作为一种性能优异的生物材料 具有良好的生物相容性 在生物医学工程领域 。 ， 、 ， 具有极大的潜在应用价值 已有研究表明 重组蛛丝蛋白可用作血管 神经导管及药物载体等 但 。 ， ， PCＲ 其生物学功能仍有待研究 本研究以大腹园蛛基因组为模板 设计特异性引物 通过 扩增获 (piriform spidroin :PySp ) (Ｒp) ; Ｒp 得大腹园蛛梨状腺丝 一个完整重复区 编码序列 此 模块与 MiSpNT /CT ， MiSpNT-PySpＲp-MiSpCT ， BL21 模块重组 构建微小型杂合蛛丝蛋白 成功在大肠杆菌 ， 8 mol /L ， MiSpNT- 中高效表达 借助 尿素裂解缓冲液进行变性纯化 得到纯度较高的杂合蛛丝蛋白 PySpＲp-MiSpCT ， 100 mg /L。CD ，MiSpNT-PySpＲp-MiSpCT