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中国农学通报 2017,33(12):82-87 Chinese Agricultural Science Bulletin 苦瓜果实商品成熟期均一化全长cDNA文库的构建及分析 韩小霞，胡新军，李勇奇，袁祖华，粟建文 （湖南省蔬菜工程技术研究中心/湖南省蔬菜研究所，长沙410125 ） 摘 要：为构建苦瓜果实商品成熟期的cDNA 文库，并对相关EST 进行序列分析，笔者以多肽二号苦瓜亲 本‘189-4 ’商品成熟期果实为材料，利用SMART 技术构建其果实的cDNA 文库。经检验该文库库容量 6 为2.08×10 ，重组率为96.29% ，平均插入片段750~2000 bp ，插入片段平均大小约1000 bp 。随机挑取400 个单克隆进行测序，共获得370 条EST ，序列分析结果表明350 条有同源性，全长率为70% ；19条序列无 匹配，单一序列为320 条，其中，片段重叠群10 个，单基因260 个，可能与营养品质相关的基因有48 个。 本研究为苦瓜果实功能基因的筛选、克隆奠定了基础。 关键词：苦瓜；果实；全长cDNA 文库；均一化；EST 分析 中图分类号：S642.5 文献标志码：A 论文编号：cas ConstructionandAnalysisofNormalizedFull-lengthcDNALibraryof BitterMelonFruitinGoodsMaturePeriod HanXiaoxia,HuXinjun,LiYongqi,YuanZuhua,SuJianwen (TheVegetableEngineeringTechnologyResearchCenterofHunanProvince/ HunanVegetableResearchInstitute,Changsha410125) Abstract:Inordertoconstructafull-lengthcDNAlibraryofbittermelonfruit in goodsmatureperiodand analyzethesequenceofEST,inthisresearch,weconstructedafull-lengthcDNAlibraryofbittermelonfruit forpolypeptidebittermelonparent ‘189-4’ingoodsmatureperiodusingtheSMARTtechnology.Thetested resultsshowedthatthecapacityofthelibrarywas 2.08×10,restructuringatarateof 96.29%,theaverage6 insertionfragmentrangedfrom 750 to 2000 bp,andtheinsertfragmentaveragesize was about 1000bp.By sequenced400monoclonalrandomly,wegot370ESTandthesequenceanalysisresultsshowedthat350hada homology,fulllengthratewas 70%; 19sequencehadnomatching, 320wasunigene,amongthemtherewere 10 contigs, 260 singlegenes,andtherewereabout 48 genespossibly relatedtothenutritionquality.This researchlaidafoundationforthescreening,cloningoffunctionalgenesforthebittermelon. Keywords:bittermelon;fruit;full-lengthcDNAl