小鼠卵巢冷冻移植后卵泡发育和卵母细胞成熟的研究 - 生理学报.pdf

生理学报 Acta Physiologica Sinica, February 25, 2006, 58 (1): 41-46 41 研究论文 小鼠卵巢冷冻移植后卵泡发育和卵母细胞成熟的研究 1,2 1,* 2 2 2 覃波霖 ，陈学进 ，施振旦 ，李万利 ，田允波 1 2 上海交通大学医学院附属新华医院发育生物学研究中心，上海 200092 ； 华南农业大学动物科学学院，广州 510642 摘 要：本研究探讨了冷冻保存的1 日龄小鼠卵巢异体异位移植后，其原始卵泡重新启动生长发育的能力。一日龄B6C2F1 小鼠卵巢分离冷冻后置液氮中保存，保存1 周~6 个月后解冻，并将卵巢移植到8~12 周龄B6C2F1 受体鼠肾脏包膜下，移 植至少14 d。每侧肾囊移植2 枚卵巢的40 只受体鼠中卵巢的回收率为45.00% (72/160) ，而每侧肾囊移植1 枚卵巢的20 只 受体鼠的回收率为82.50% (33/40) 。移植卵巢上卵泡的发育基本与体外自然生长鼠的卵巢卵泡发育情况一致。对卵巢移植 19 d 的受体鼠用孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotrophin, PMSG)处理后, 从移植卵巢上发育成熟卵泡中获得 的卵母细胞在MEMα 培养基中培养16~17 h，有40.90% 的卵母细胞发生生发泡破裂(germinal vesicle breakdown, GVBD) ， 其中89.02% 的卵母细胞发育到第二次减数分裂中期(metaphase II, MII) 。将剩余的卵母细胞继续培养到20~21 h, 又有50.83% 的卵母细胞发生生发泡破裂, 但其中只有21.40% 的卵母细胞能够发育到MII 期。以上结果说明，小鼠早期卵巢经过冷冻- 解冻并异体异位移植后，其原始卵泡能够重新启动生长发育，发育后的卵泡卵母细胞能够在体外培养成熟。这些结果意 味着原始卵泡或卵巢冷冻- 移植技术有可能充分利用雌性生殖细胞用于濒危动物保种、建立动物基因库和人类辅助生殖等。 关键词：卵巢；冷冻保存；异体异位移植；原始卵泡；卵母细胞；小鼠 ÖÐͼ·ÖÀàºÅ£ºQ813.7 Investigation of follicular development and oocyte maturation after cryopreservation and xenograft of newborn mouse ovaries 1,2 1,* 2 2 2 QIN Bo-Lin , CHEN Xue-Jin , SHI Zhen-Dan , LI Wan-Li , TIAN Yun-Bo 1The Laboratory of Developmental Biology, Xinhua Hospital, School of Medical Sciences, Shanghai Jiaotong University, Shang- hai 200092, China; 2 College of Animal Sciences, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China Abstract: In order to explore the feasibility of cryopreserving primordial follicles in attaining their developmental competence following freezing and thawing, ovaries from newborn mice were cryopreserved and the thawed ovaries were xenografted into kidney capsules of adult female mice. Ovaries were isolated from newborn B6C2F female mi