甘蓝bosu03 蛋白基因的克隆及其与srk 相互作用分析 - 园艺学报.pdf

园艺学报，2015 ，42 (11) ：2206 –2214. Acta Horticulturae Sinica 2206 doi ：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0352；http ：//www. ahs. ac. cn 甘蓝 BoSU03 蛋白基因的克隆及其与 SRK 相互 作用分析 1,* 2,* 2 2 2 2 2 毕云龙 ，高启国 ，施松梅 ，刘晓欢 ，蒲全明 ，张 莹 ，张林成 ， 廉小平1 1 1,2,** ，柳 菁 ，朱利泉 1 2 （西南大学农学与生物科技学院，重庆 400716 ； 西南大学园艺园林学院，西南大学重庆市蔬菜学重点实验室，重 庆 400716 ） 摘 要：扩增了从甘蓝柱头蛋白质谱鉴定中获得的泛素蛋白 BoSU03 基因的编码序列。序列分析表明 BoSU03 与甘蓝泛素蛋白 Bol003815 的核苷酸序列相似性最高，达 98%，含有臂重复结构域，属于植物泛 素蛋白家族。为探究 BoSU03 是否为自交不亲和 S 位点受体激酶（SRK ）下游的互作蛋白，以 SRK 与 ARC1 相互作用为对照，利用 GAL 酵母双杂交系统对 SRK 与 BoSU03 进行了相互作用验证，结果表明， BoSRK/BoSU03 的转化酵母在四缺平板 SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/x-α-gal/25 mmol 3-AT 上长势较好，显色较 深，进一步检测发现 BoSRK/BoSU03 转化酵母的β –半乳糖苷酶活性值大于BoSRK/BoARC1 转化酵母的 活性值，这为进一步分析鉴定 BoSU03 是否参与 SRK 下游信号传导过程提供了依据。 关键词：甘蓝；S 位点受体激酶（SRK ）；BoSU03 ；植物泛素蛋白家族（PUB ）；下游信号蛋白；酵 母双杂交系统 中图分类号：S 635.1 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2015 ）11-2206-09 Molecular Cloning of BoSU03 and Analysis of the Interaction Between SRK and BoSU03 in Brasscia oleracea 1,* 2,* 2 2 2 2 BI Yun-long ，GAO Qi-guo ，SHI Song-mei ，LIU Xiao-huan ，PU Quan-ming ，ZHANG Ying ， ZHANG Lin-cheng2 1 1 1,2,** ，LIAN Xiao-ping ，LIU Jing ，and ZHU Li-quan 1 2 （College of Agronomy and Biotechnology，Southwest University ，Chongqing 400716