排除酚类物质干扰提取棉苗线粒体dna 的简易方法ξ - 浙江大学农业与 .pdf

( ) 棉 花 学 报　 　　1998, 10 4 ∶205～ 209 A cta Go ssyp ii Sinica 排除酚类物质干扰提取棉苗线粒体DNA 的 简易方法 ① 王学德　朱　军　朱英国 　浙江农业大学农学系　杭州　310029 摘要　提出一种排除酚类物质干扰提取棉苗线粒体 ( ) 的 DNA m itochondrial DNA m t DNA 简便和经济的方法。本法提取的m tDNA 易被限制性内切酶酶切, 适用于 sou thern 杂交, PCR 扩增和分子克隆。 关键词　棉苗　线粒体DNA 　提取方法 中图分类号　 562: 78 S Q A Sim ple Procedure for Isola tion of M itochondr ia l D NA from Cotton Seedlings by Avo id ing D isturbance of Phenolic Com pounds W ang Xuede　Zhu Jun A g ronom y D ep a rtm en t , Z hej iang A g ricu ltu ra l U n iversity , H ang z hou 　310029 Zhu Y ingguo 　Colleg e of L if e S ciences , W uhan U n iversity , W uhan 430072 　 ( ) Abstract A sim p le p rocedu re fo r iso lation of m itochondrial DNA m tDNA from co tton seedlings (Gossyp ium h irsu tum L. ) has been developed. T he m tDNA ob tained w ith th is p rocedu re can be digested w ith restriction endonuclease and is availab le fo r Sou thern b lo t analysis, PCR am p lification and ligation reaction. 　 　 　 Key words co tton seedlings m itochondrial DNA iso lation p rocedu re 棉花的根、茎、叶等器官组织中含有大量的色素腺体, 酚类化合物主要存在于这种腺体 中, 其中棉酚占主要成分。如棉子仁的棉酚含量约占总重量的 01% , 高的可达 10% 。棉酚 含有酚基和羟基, 是一类相当活泼的化合物, 在植物细胞破碎时能与核酸作用形成稳定的不 可逆的复合物[ 1～ 2 ] 。用常规的苯酚氯仿抽提方法获得的棉花DNA 常呈棕褐色, 不易被限制 收稿日期　1997—08—15, 中国博士后科学基金和国家教委博士点专项科学基金资助课题 　① 武汉大学生命科学学院　武汉　430072 206 棉　花　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　10 卷 性内切酶酶切[ 1～ 3 ] 。国外, 常用氯化铯梯度超速离心法, 虽可获高纯度的DNA , 但因费用高 ( ) 和设备限制, 在国内普通实验室不易适应。国内, 翁坚