土壤中有效磷的测定 - 厦门大学化学化工学院.ppt

土壤中有效磷的测定 徐磊一、概述 土壤中的磷大部分不能被植物直接吸收利用，易被吸收利用的有效磷通常含量很低。土壤中的有效磷是指能为当季作物吸收的磷量。 土壤中有效磷的测定方法有：生物方法、同位素方法、阴离子交换树脂方法及化学方法等。其中应用最普遍的是化学方法。它是用浸取剂提取土壤中的一部分有效磷。浸取剂种类很多，它的选择主要根据各种土壤的性质而定。酸性土壤中磷酸铁和磷酸铝形态的有效磷可用酸性氟化铵提取，形成氟铝化铵和氟铁化铵配合物，少量的钙离子形成氟化钙沉淀，磷酸根离子被提取到溶液中来，石灰性土壤则采用碳酸氢钠溶液浸取。 实验目的 实验原理 主要仪器和试剂 实验步骤 注意事项 一、实验目的 1、了解光度法测定土壤中有效磷的原理及方法 2、熟悉分光光度计的使用 二、实验原理 在含磷的溶液中，加入钼酸铵，在一定酸度条件下，溶液中的磷酸与钼酸络合形成黄色的磷钼杂合酸——磷钼黄。 H3PO4+12H2MoO4==H3[PMo12O40]+12H2O 在适宜的试剂浓度下，加入适当的还原剂（SnCl2或抗坏血酸），使磷钼酸中的一部分Mo（Ⅳ）还原为Mo（Ⅴ生成磷钼蓝（磷钼杂多蓝）——H3PO4·10MoO3·Mo2O5或H3PO4·8MoO3·2Mo2O5。在一定的范围内，蓝色的深度与磷含量成正比，这是钼蓝比色法的基础。 三、主要仪器和试剂 1、 仪器：721分光光度计，25mL容量瓶，吸量管，振荡机，漏斗，滤纸。 2、? 试剂： （1）???HCl溶液（0.5mol/L） （2）???NH4F溶液（1mol/L） （3）??提取剂：分别移取15mL 1mol/LNH4F溶液和25mL 0.5mol/LHCl溶液，假如460mL蒸馏水中，配制成0.03mol/L NH4F-0.025mol/L HCl溶液。 （4）?? H3BO3溶液（100g/L） （5） 15g/L钼酸铵-3.5mol/L盐酸溶液：溶解15g钼酸铵于300mL蒸馏水中，加热至60℃左右，如有沉淀，将溶液过滤，待溶液冷却之后，慢慢加入350mL 10mol/L HCl溶液，并用玻璃棒迅速搅动，待溶液冷却至室温，用蒸馏水稀释至1L，充分摇匀，储存于棕色瓶中。放置时间不得超过两个月。 （6）氯化亚锡溶液（25g/L）：称取氯化亚锡2.5 g溶于10mL浓盐酸中，溶解后加入90mL蒸馏水，混合均匀置于棕色瓶中，此溶液现配现用。 （7）磷标准溶液（50μg/mL）：准确称取105℃烘干的KH2PO4（A.R）0.2195g，溶解于400mL水中加浓H2SO45mL(防止溶液长霉菌)，转入1L容量瓶中，加水稀释至刻度，要匀。准确移取上述磷标准溶液25.00mL于250mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，即为5μg·/m L-1（此溶液不宜久存）。 四、实验步骤 1、土壤样品预处理 称取风干土壤样品1g（精确至0.01g）,放入50~100mL小塑料瓶（或50mL带塞比色管）中，加入0.03mol·L-1NH4F-0.25mol·L-1HCl溶液20mL，稍摇匀，立即放在振荡机上，振荡30分钟。用无磷干滤纸过滤，滤纸承接于盛有100g·L-1H3BO3溶液15滴的50mL 三角瓶中，摇动瓶内溶液（加H3BO3防止F-1对显色的干扰和腐蚀玻璃仪器）。 2、土壤中有效磷的测定 准确移取上述土壤滤液5~10mL容量瓶中，用吸量管加入15g·L-1钼酸铵-盐酸溶液5mL，摇匀，加入蒸馏水至瓶颈刻度，滴加25g·L-1.氯化亚锡3滴后，再用水稀释至刻度，充分摇匀。显色15min后，再分光光度计上，以试剂为空白，用1cm比色皿在680nm处测其吸光度值。 3．工作曲线的制作 分别准确移取5μg·mL-1磷标准溶液0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL于6个25mL容量瓶中，加入0.03mol·L-1NH4F-0.025mol·L-1HCl溶液5-10 mL（按所取滤液毫升数而定），用吸量管加钼酸铵-盐酸溶液5mL，加蒸馏水至瓶颈刻度，并滴加25g·L-1氯化亚锡3滴，摇动后，至溶液有深蓝色出现，用水稀释至刻度，摇匀，放置15分钟，与土样溶液同时显色，测其吸光度。 以磷的微克数为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，并从标准曲线上查出土样中磷的含量。 五、注意事项 用氯化亚锡作还原剂作还原剂生成磷钼盐，溶液的颜色不够稳定，必须严格控制比色时间，一般在显色后的15-20分钟内颜色较为稳定，显色后应准确放置15min后，立即比色，并在5min内完成比色操作。 参考文献 武汉大学化学与分子科学学院实验中心主编.《分析化学实验》.武