大鼠脑片的器官型培养及其中神经元的发育规律 - 北京大学学报(医学版).pdf

北 京 大 学 学 报 （ 医 学 版 ） ·(%9 · CEP7/8] E3 N=^Z/ P/Z_=7*ZR‘（4=8]R4 *UZ=/U=* ）! _@2$ ’,! /@$ (! 8DB$ #%%5 ·论著 · 大鼠脑片的器官型培养及其中神经元的发育规律 ! # # 郑! 梅 ，樊东升 ，张! 俊 ，宋德懋 ，范少光 （$ 北京大学第三医院神经内科，北京! %%%’ ；# $ 北京大学基础医学院生理学与病理生理学系） ［摘! 要］目的：建立器官型脑片培养的方法，证明体外培养到一定时间神经元发育成熟，可在此基础上制作神经 系统变性疾病模型。方法：取出生#( ) 内*+ 大鼠的额叶皮质作器官型培养。取培养, - ( . 内每天的及培养第’ 周、( 周和 周时的脑片，固定、脱水、切片后行/0112 和抗神经丝重链（/34 ）免疫组化染色。同时用正常生长大鼠 的脑片作对照，观察与培养脑片染色结果的异同。结果：/0112 染色结果显示，培养脑片中的锥体细胞体积逐渐增 大、染色变浅， - ( 周内皮质分层清晰。抗/34 免疫组化染色显示，培养至第% 天时，位于第 层的锥体细胞着 ! 色，第# 天以后 层和 层均着色。对照组第5 天时 层着色，’ 周以后 层和 层都着色。对位于6 区的第 ! ! ! ! 层锥体细胞进行计数，从培养第# 天开始至# 个月时，神经元数目保持恒定。结论：器官型脑片培养适用于出生 后神经元发育的研究，并可用于制作神经系统变性疾病的体外模型。 ［关键词］器官培养；脑；神经元；疾病模型，动物 ［中图分类号］ 7’’! ! ［文献标识码］8! ! ［文章编号］9, :9,;（#%%5 ）%(:%(%9:%( !#$%’()*+ +,,-$. /.*+, +0.’0, $%1 ’2, +0/, 3 %,0%$. 1,4,.)5,%’ *% *’ 4=/ 6?0 ，38/ +@AB:1)?AB! ，48/ CDA ，*E/ +?:FG@# ，38/ *)G@:BDGAB# （H +?IGJKF?AK @L /?DJ@2@BM ，N?O0AB PA0Q?J10KM R)0J. 4@1I0KG2 ，S?0T0AB %%%’ ，U)0AG ；# $ +?IGJKF?AK @L N)M10@2@BM GA. NG: K)@2@BM ，N?O0AB PA0Q?J10KM *V)@@2 @L SG10V 6?.0VG2 *V0?AV?1 ） 6789:6;9! !-,+’*4, ：R@ ?1KGW201) G F?K)@. @L @JBGA@KMI0V V?J?WJG2 VD2KDJ?$ *@ G1 K@ IGQ? K)? XGM L@J WD02.0AB 1@F? A?DJ@.?B?A?JGK0Q? .01?G1? F@.?21$ =,’21/ ：EJBGA@KMI0V V?J?WJG2 VD2KDJ?1 X?J? IJ?IGJ?. LJ@F IJ?LJ@AKG2 WJG0A @L A?@AGKG2 *+ JGK1$ 8LK?J VD2KDJ0AB , K@ ( .GM1 ，’ X??O1 ，( X??O1 GA. X??O1 ， J?1I?VK0Q?2M ，V?J?WJG2 120V?1 X?J? L0Y?. ，.?)M.JGK?. GA. 1?VK0@A?. 0A VJM@1KGK$ R)? 1?VK0@A1 IJ@V??.?. X0K) /0112 1KG0A0AB GA. A?DJ@L02GF?AK )0B) F@2?VD2GJ X?0B)K （/34 ）0FFDA@)01K@