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动物细胞培养及核移植
动物细胞培养 获得细胞 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体 培养结果 或细胞产物 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 比较 肿瘤组织或细胞 > 正常组织或细胞 拓展---动物细胞或组织培养的难易程度 幼体组织或细胞 > 老龄组织或细胞 分化程度低的组织或细胞 > 分化程度高的组织或细胞 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 克隆就是无性繁殖,具体地说,是指 一个共同的祖先,通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。 a.分子水平上: b.细胞水平上: c.个体水平上: 1. 什么是克隆? 一般指DNA克隆。 指一个单一的细胞分裂所形成的细胞群体。 指基因型完全相同的两个或一个群体。 2、克隆动物能否用类似植物组织培养的方法获得?为什么? 目前不能。 因为动物细胞的全能性随着分化程度的提高逐渐受到限制。目前,用动物体细胞克隆的动物,实际上是通过核移植来实现的。 动物核移植 是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成为一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。(克隆动物) 动物核移植 胚胎细胞核移植 体细胞核移植 动物体细胞核移植技术 1.回忆克隆羊“多莉”的培育过程 卵细胞 A母绵羊 B母绵羊 乳腺细胞 核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 融合后的卵细胞 ( MⅡ卵母细胞) 减数第二次分裂中期 2.结合P48图2-21,叙述克隆高产奶牛的培育过程。 将供体细胞注入去核卵母细胞 核移植 胚胎移植 供体细胞培养 1、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程,找出操作过程的不同点? 2、讨论分析上述哪一种措施更科学?并说明理由? MⅡ卵母细胞细胞质中含有的物质更易支持胚胎的全程发育,用它作受体更容易成功。 将供体细胞注入受体细胞,使克隆动物更像供体动物,操作也方便。 思考与讨论: (1)多莉克隆过程中受体细胞是去核卵细胞,高产奶牛克隆过程中受体细胞是去核卵母细胞。 (2)多莉克隆过程是将供体细胞核注入受体细胞,而 高产奶牛的克隆过程是将供体细胞注入受体细胞。 1、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必须先去掉受体卵母细胞的核? 为使核移植动物的核遗传物质全部来自有利用价值的动物提供的细胞。 2、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞,为什么? 10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型, 未发生突变。 讨 论: 3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么? 克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核,但核外还有少部分DNA(如线粒体DNA)来自受体卵母细胞。 不是 (三)体细胞核移植技术的应用前景 阅读P49-50 1、畜牧业方面: 2、医药卫生方面: 可以加速家畜遗传改良的进程,促进优良畜群繁育。 保护濒危物种,增加其存活数量 生产医用蛋白质 组织器官的移植 3、其他领域 了解胚胎发育及衰老过程 更好追踪研究疾病的发展过程、治疗疾病 (四)体细胞核移植技术存在的问题 1、成功率低 2、克隆动物存在健康问题 细胞株: 从原代培养细胞群中筛选出进行传代培养的细胞,能传到40-50代,其遗传物质没有发生变化。 细胞系: 传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生了变化,带有癌变的特点,可能在培养条件下无限制的传代下去,这种传代细胞称为细胞系。 * * (l).幼龄动物的器官或组织或动物胚胎(2).剪碎;胰蛋白;使每个细胞能与培养液接触(3).葡萄糖.氨基酸.无机盐.维生素和动物血清:10 原代培养(4)细胞悬液(1:2或1:3) 细胞未发生癌变 * 动物细胞工程 通常采用的技术手段 动物细胞培养 动物细胞融合 生产单克隆抗体 动物细胞核移植 是其他动物细胞工程技术的基础。 阅读P.44 第1段,思考动物细胞工程常用的技术手段有哪些,作为基础的是哪项技术? 阅读教材P.44-46,思考: 1.为什么要进行动物细胞培养? 2.什么是动物细胞培养? 3.怎样进行动物细胞培养?(关注过程和条件) ——重点 4.动物细胞培养的应用。 资料一: 培养的动物细胞还可以用于检测有毒物质。许多致畸、致癌物质加入培养液后,培养细胞会发生染色体结构和数目的变异。根据变异细胞占全部培养细胞的百分数,可以判断某种物质的毒
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