两种破骨细胞培养方法的比较及其吸收骨质的动态观察 - 北京大学学报.PDF

北 京 大 学 学 报 （ 医 学 版 ） ·14F · b,L?P@8 ,‘ A9^HPQ LPHZ9?MHK（29@82 M-H9P-9M ）! Z%*X 4B! P%X 1! ,)’X .##1 ·论著 · 两种破骨细胞培养方法的比较及其吸收骨质的 动态观察 ! 李斌斌，于世凤 ，庞淑珍 （北京大学口腔医院病理科，北京! ###$） ［摘! 要］目的：比较分析破骨细胞（%’(%)*+’ ，,- ）体外分离培养的方法，并动态观察其形态、分化及功能，为进一 步探讨药物对,- 性骨吸收的作用奠定基础。方法：采用两种,- 的培养方法，即从新生./ 0 的兔长干骨骨髓腔内 壁机械分离成熟,- 和，.1（,2 ）维生素3 诱导鼠骨髓细胞形成破骨样细胞（%’(%)*+’5*67( )(** ，,8- ）的方法， . 4 对获得的,- 进行形态学和功能观察。结果：倒置显微镜下观察，,- 是一种多核巨细胞，有伪足并借助伪足的凹 29 染色均可见,- 多核、胞浆有空泡；特异性抗酒石酸酸性磷酸酶（’+:’:+’(5:(6’+;’ 凸伸缩而变化形态、运动行走； +)6 =0%=0+’+( ，?@A ）染色可见,- 胞浆阳性，呈酒红色，多核。体外,- 与骨片共同培养形成骨吸收陷窝，且在 培养的B 内陷窝数目和面积逐渐增大。，.1（,2 ）维生素3 诱导鼠骨髓细胞形成,8- ，其形态结构特征与成 . 4 熟,- 相同，诱导出的破骨样细胞数目多于机械分离的方法，但每个细胞胞核数目总体上少于机械分离的方法，而 且胞核多位于细胞周边，在骨片上形成的陷窝也较小而浅；培养液上清中的钙离子含量和酸性磷酸酶（+)6 =0%5 =0+’+( ，@-A ）含量在培养的 C . 内随时间逐渐增加。结论：针对不同实验目的可以采用不同的分离培养,- 方法。从骨髓腔内壁机械分离培养的方法可获得骨吸收功能较活跃的,- 。，.1 （,2 ）维生素3 诱导鼠骨髓细 . 4 胞形成的,8- 数量较多，适于对,- 分化过程的研究。 ［关键词］破骨细胞；细胞培养；骨质吸收 ?4.DE ./! ! ［文献标识码］@! ! ［文章编号］FB 5FBG（.##1 ）#15#14F5#F ［中图分类号］ !#$%’() * +, #-+./( * ’(0%+’) %)/ 120+2- * (+-10%(+( %)/ +.- /3)%#’1 4(-5%+’) * 4)- -($+’) 8H I6;5J6; ，KL M065N(;O ! ，A@PQ M0R5S0(; （A(76;O L;6T(:6’U M)0%%* %N M’%V+’%*%OU ，I(6W6;O ###$，-06;+ ） 6789:6!9! ;4-1+’5- ：% ’RU ’0( %:6O6; ，V%:=0%*%O6)+* ’:R)’R:( ，+; NR;)’6%;+* :(OR*+’6%; %N %’(%5 )*+’（,- ）N%: NR:’0(: 6;T(’6O+’6%; %; ’0( V()0+;6V +; :(OR*+’6%; %N J%;( :(%:=’6%;X =-+./( ：0( ,- Y(:( 6%*+’( JU ’Y% 76; %N ’:+6’6%;+* V(’0%X ,’(%)*+’ Y(:( 6%)*+’( N:%V ;(%;+’+* :+’ *%;O J%;(X 0( )U’%)0