小檗碱和育亨宾对内毒素血症小鼠脾脏TLR4信号通路中相关基因表达的影响.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(4)：655—663 · 655 · [文章编号] 1000—4718(2012)04—0655—09 小檗碱和育亨宾对 内毒素血症小鼠 脾脏 TLR4信号通路 中相关基 因表达的影响 李 辉 ， 王一阳 ， 李红梅 ， 王发强 ， 吕秀秀 ， 戚仁斌 ， 陆大祥 ， 王彦平 ， 王华东 (暨南大学 附属第一医院耳鼻咽喉科 ， 。医学院病理生理学系，国家中医药管理局病理生理三级科研实验室，广东 广州510632) [摘 要] 目的：观察小檗碱和 仪 肾上腺素能受体拮抗剂育亨宾对 内毒素血症小 鼠脾脏 Toll样受体4 (TLR4)信号通路84种基因表达的影响，并初步探讨其作用机制。方法：雄性 BALB／c小 鼠随机分为对照组、脂多 糖 (LPS)组、小檗碱+I2S组、小檗碱 +育亨宾+LPS组、育亨宾 +LPS组 、小檗碱组 、小檗碱 +育亨宾组和育亨宾 组。分别用蒸馏水、小檗碱 (50mg／kg)、小檗碱+育亨宾(50mS／kg+2mg／kg)和育亨宾(2ms／kg)灌 胃，每天 1 次，连续3d，第3d灌 胃1h后 ，腹腔注射LPS(20mg／kg)或生理盐水。腹腔注射 1h后，用R Pr le PCRArray 分析技术检测小鼠脾脏TLR4信号通路84种基因mRNA的表达；用 Westernblotting分析小鼠脾脏TLR4信号通路 的抑制分子细胞因子信号抑制物 (sots)1、SOCS3和白细胞介素 一1受体相关激酶(IRAK)一M蛋白的表达。结 果：LPS可上调小鼠脾脏TLR4信号转导通路中相关炎症因子的mRNA表达，包括CXCL10、TNF一0、【IL—la、IL一 1B、IL一6、IFN一^y和IFN—B。小檗碱能显著下调下调髓样分化因子(MyD88)依赖信号通路下游TNF— 、IL—ld、 IL一1B和IL一6mRNA的表达，也能MyD88非依赖信号通路下游基因 IFN—B和CXCL10mRNA的表达 (P0． 05)。育亨宾能显著下调内毒素血症小 鼠脾脏IL一1仅、IL一1B和IFN—BmRNA的表达 (P0．05)，但对TNF—Ot、 IL一6和CXCL10mRNA表达的下调作用与LPS组相比没有显著差异(P0．05)。小檗碱与育亨宾合剂能显著下 调内毒素血症小鼠脾脏IFN—B和CXCL10mRNA的表达 ，但不能显著下调内毒素血症小鼠脾脏IL一1、IL一1B、 TNF一仅和IL一6mRNA的表达。LPS攻击后 1h，小檗碱和(或)育亨宾均不能增强内毒素血症小鼠脾脏 SOCS1、 SOCS3和IRAK—M蛋白的表达。结论：小檗碱和育亨宾均能抑制LPS诱导的MyD88依赖和非依赖信号通路下游 部分基因的表达，这种抑制作用的机制与SOCS1、SOCS3和IRAK—M蛋白无关。 [关键词】 小檗碱 ；育亨宾；内毒素血症 ；Toll样受体4；小鼠 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．40．014 EffectofberberineandyohimbineonTLR4-·dependentgeneexpression in spleenofendotoxemicmice LIHui，WANGYi—yang2 LIHong—nle～l，WANGFa—qiang，LOXiu—xiu，QIRen ， — bin ，LU Da—xiang2 WANG Yan—ping ，WANG Hua—dong ． ， (DepaamentofOtolaryngology，TheFirstAffiliatedHospital，DepartmentofPathophysiology，KeyLaboratoryofStateAd-