2015年版药典非无菌药品微生物限度检查操作规程.doc

非无菌药品微生物限度检查操作规程 起草人 日　期 年　月　日 执行日期 2015年12月01日 审核人 日　期 年　月　日 颁发部门 质保部 批准人 日　期 年　月　日 分　发 部　门 质保部（）份　 质检部（）份 生产部（）份 物资部（）份 设备部（）份　 采供部（）份 销售部（）份　 行政部（）份 财务部（）份 变更记载： 修订号 执行日期 00 2012年06月01日 01 2014年05月01日 02 2015年12月01日 1. 目的：建立非无菌药品微生物限度检查检验标准操作规程，规范检验操作，确保检验结果准确。 2. 适用范围：适用于本公司所有采用非无菌药品微生物限度检查法测定的供试品。 3. 责任者：QC检验员、QC经理。 4. 正文： 4.1 非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法微生物计数法系用于能在有氧条件下生长的嗜温细菌和真菌的计数。 当本法用于检查非无菌制剂及其原、辅料等是否符合规定的微生物限度标准时，应按下述规定进行检验，包括样品的取样量和结果的判断等。除另有规定外，本法不适用于活菌制剂的检查。 本检查法可采用替代的微生物检查法，包括自动检测方法，但必须证明替代方法等效于药典规定的检查方法。 微生物计数试验应在受控洁净环境下的局部洁净度不低于B 级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区域、工作台面及环境应定期进行监测。 如供试品有抗菌活性，应尽可能去除或中和。供试品检查时, 若使用了中和剂或灭活剂，应确认其有效性及对微生物无毒性。 供试液制备时如果使用了表面活性剂，应确认其对微生物无毒性以及与所使用中和剂或灭活剂的相容性。计数方法 计数方法包括平皿法、薄膜过滤法和最可能数法（Most-Probable-NumberMethod，简称MPN 法）。MPN 法用于微生物计数时精确度较差，但对于某些微生物污染量很小的供试品，MPN 法可能是更适合的方法。 供试品检查时, 应根据供试品理化特性和微生物限度标准等因素选择计数方法，所选的方法必须具备检测充足样品量的能力，以保证所获得的试验结果能够判断供试品是否符合规定。所选方法的适用性须经确认。 计数培养基适用性检查和供试品计数方法适用性试验 供试品微生物计数中所使用的培养基应进行适用性检查。 供试品的微生物计数方法应进行方法适用性试验，以确认所采用的方法适合于该产品的微生物计数。 若检验程序或产品发生变化可能影响检验结果时，计数方法应重新进行适用性试验。 表1 试验菌液的制备和使用 试验菌液的制备 计数培养基适用性检查 计数方法适用性试验 需氧菌总数计数 霉菌和酵母菌总数计数 需氧菌总数计数 霉菌和酵母菌 总数计数 金黄色葡萄球菌(Staphylococcusau-reus)〔CMCC(B)26 003)〕 胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨液体培养基，培养温度30～35℃，培养时间18～24小时 胰酪大豆胨琼脂培养基和胰酪大豆胨液体培养基，培养温度30~35℃，培养时间不超过3?天，接种量不大于100cfu 胰酪大豆胨琼脂培养基/胰酪大豆胨液体培养基（MPN法），培养温度30～35℃，培养时间不超过3?天，接种量不大于100cfu 铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeru-ginosa） 〔CMCC（B）10 104〕 胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨液体培养基，培养温度30～35℃，培养时间18～24小时 胰酪大豆胨琼脂培养基和胰酪大豆胨液体培养基，培养温度30～35℃，培养时间不超过3天，接种量不大于100cfu 胰酪大豆胨琼脂培养基/胰酪大豆胨液体培养基（MPN法），培养温度30～35℃，培养时间不超过3?天，接种量不大于100cfu 枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis) 〔CMCC(B) 63 501〕 胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨液体培养基，培养温度30～35℃，培养时间18～24小时 胰酪大豆胨琼脂培养基和胰酪大豆胨液体培养基，培养温度30～35℃，培养时间不超过3天，接种量不大于100cfu 胰酪大豆胨琼脂培养基/?胰酪大豆胨液体培养基（MPN法），培养温度30～35℃，培养时间不超过3?天，接种量不大于100cfu 白色念珠菌 (Candida albicans) 〔CMCC(F) 98 001〕 沙氏葡萄糖琼脂培养基或沙氏葡萄糖液体培养基，培养温度20～25℃，培养时间2～3?天 胰酪大豆胨琼脂培养基，培养温度30～35℃，培养时间不超过5天，接种量不大于100cfu 沙氏葡萄糖琼脂培养基，培养温度20～25℃，培养时间不超过5天，接种量不