细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒.PDF

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-168-3301或800-8283301 订货e-mail ：order@ 技术咨询：info@ 碧云天网站 微信公众号 网址： 细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒 产品编号 产品名称 包装 P0027 细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒 50次 产品简介：  在研究细胞时经常要研究细胞的不同组份，而研究得最多的两个细胞组份就是细胞核和细胞浆。分离细胞核蛋白和细胞浆 蛋白，不仅可以用于研究蛋白在细胞内的定位，而且很多时候分离出来的核蛋白可以用于转录调控方面的研究，例如 EMSA(也称gel shift)，footprinting等。  细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒(Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit)提供了一种比较简单、方便的从培养细胞 或新鲜组织中抽提细胞核蛋白与细胞浆蛋白的方法。约90分钟就可以完成培养细胞的细胞核蛋白与细胞浆蛋白的分离。抽 提得到的蛋白可以用于Western ，EMSA ，footprinting，报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。  本试剂盒是通过细胞浆蛋白抽提试剂A和B ，在低渗透压条件下，使细胞充分膨胀，然后破坏细胞膜，释放出细胞浆蛋白， 然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过高盐的细胞核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。  对于细胞样品，如果每个样品的数量不超过二百万个细胞，本试剂盒可以抽提50个样品；对于组织样品，如果每个样品的 重量不超过30毫克，本试剂盒可以抽提50个样品，如果每个样品约为30-60毫克，本试剂盒可以抽提37个样品。 包装清单： 产品编号 产品名称 包装 P0027-1 细胞浆蛋白抽提试剂A 15ml P0027-2 细胞浆蛋白抽提试剂B 0.5ml P0027-3 细胞核蛋白抽提试剂 2.5ml — 说明书 1份 保存条件： -20ºC保存，一年有效。 注意事项：  需自备PMSF 。PMSF一定要在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。PMSF(ST506)可以 向碧云天订购。  抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或4ºC进行。  本试剂盒对于组织样品，仅适合于新鲜组织，对冻存过的组织抽提效果很差。  使用本试剂盒抽提到的细胞核蛋白与细胞浆蛋白均可直接用碧云天生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0009/P0010/P0010S/ P0011/P0012/P0012S)测定蛋白浓度。但不适合用Bradford法测定蛋白浓度。  本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。  为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明： 1. 准备溶液：室温融解试剂盒中的三种试剂，溶解后立即放置在冰上，混匀。取适当量的细胞浆蛋白抽提试剂A备用，在使用 前数分钟内加入PMSF ，使PMSF 的最终浓度为1mM。取适当量的细胞核蛋白抽提试剂备用，在使用前数分钟内加入PMSF ， 使PMSF 的最终浓度为1mM。 2. 对于贴壁细胞：用PBS洗一遍，用细胞刮子刮下细胞，或用EDTA溶液处理细胞使细胞不再贴壁很紧，并用移液器吹打下