薄层色谱分离.ppt

　　第一课时完成　 　　　2008.4.11 * 课题2　 用纸层析法分离Fe3+和Cu2+ 一、色谱分析法： 1、简介：基于混合物各组分在体系中两相的物理、化学性能差异（如吸附、分配差异等）而进行分离和分析的方法。 　国际公认俄国M.C.茨维特为色谱法的创始人。 色谱法体系中的两相作相对运动时，通常其中一个相是固定不动的，称为固定相；另一相是移动的，称为流动相;滤纸或其它载体作为惰性支撑物 菠菜的叶绿体中色素的提取和分离 2、色谱法的应用展示： （1）按流动相和固定相的不同，色谱法分为气相色谱法和液相色谱法。气相色谱法的流动相是气体，液相色谱法的流动相是液体 （2）按吸附剂及其使用形式可分为柱色谱、纸色谱和薄层色谱。 （3）按吸附力可分为吸附色谱、离子交换色谱、分配色谱 （4）按色谱操作终止的方法可分为展开色谱和洗脱色谱。 （5）按进样方法可分为区带色谱、迎头色谱和顶替色谱。 3、色谱法的分类： 纸色谱，以滤纸为载体，是以滤纸纤维及其结合水作为固定相，以有机溶剂作为流动相的分配色谱分离。纸上色谱分离具有设备简单、操作方便、分离效率高、所需样品量少等优点，但分离量少、回收困难，分离速度慢等； 柱色谱，具有进样量大，回收容易等优点，但其分辨率不如纸上色谱和薄层色谱高； 薄层色谱分离 ，将固定相在玻璃平板上铺成薄层而进行分离的一种分离技术。薄层色谱是柱色谱和纸上色谱两者的结合。 二、实验原理 含有Cu2＋和Fe3＋的溶液涂在滤纸一端，丙酮作展开剂，在滤纸的毛细作用下，展开剂携带Cu2＋和Fe3＋沿滤纸纤维向上移动因为速度不同（吸附和溶解能力的不同），一段时间后，Cu2＋和Fe3＋距起点的距离会不同，从而达到分离的目的。 三、实验操作要点及主要实验现象 1．操作要点 （1）裁纸 （2）点样 （3）展开 （4）显色 (5) 分离 四：实验方案设计 装置制作 点层析试样 配展开剂 层析操作 显色反应 操作步骤： 操作要点： 滤纸剪成约1cm宽，10cm长(保证下端能浸入展开剂中1cm)的滤纸条，一端固定在橡胶塞上，在距滤纸条一端2cm处用铅笔画一小圆点。 配试样后，用毛细管蘸取试样在“原点”处点直径0.3-0.5cm的斑点，晾干后再点。重复3-5次。也在滤纸下方距离底边2cm处画出混合液细线代替点样。 用丙酮9mL,6mol/L盐酸1mL配成展开剂。 展开剂不可沾到试管壁，点样后的滤纸条不可接触试管内壁，滤纸条下端浸入展开剂中1cm,注意不要让试样点触及展开剂。 注意观察滤纸条上色带的变化，滤纸条取下后用氨气熏，观察颜色变化；氨熏应在通风橱中进行 （1）层析过程中的实验现象 （2）氨熏后的实验现象 五、实验操作要点及主要实验现象 用小烧杯代替大试管。用铁丝横穿过滤纸，架在烧杯上方（如图）。调节完滤纸高度后，盖上培养皿形成气室。 氯化铁层，颜色较深 硫酸铜层，颜色稍浅 用纸层析法分离铁离子和铜离子 六、实验注意事项 1、为防止水解，饱和FeCl3和CuSO4可加少量HCl或H2SO4酸化，不影响实验效果。 2、氨熏需在通风实验室内进行。 3、层析速度开始较快，后逐渐减慢，大约10分钟即可分离完全。 *