cthrc1抑制小鼠肝星状细胞的增殖.pdf

·５９２· ＣｈｉｎＪＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２０１６，Ｖｏｌ．２１，Ｎｏ１０ Ｃｔｈｒｃ１抑制小鼠肝星状细胞的增殖 １ ２ １＃ 钟　巍 　卞兆连 　马　雄 １ 上海交通大学医学院附属仁济医院消化科　上海市消化疾病研究所 （２００００１） 南通市第三人民医院消化科　南通市肝病研究所２ 　　背景：研究发现胶原三螺旋重复蛋白１（Ｃｔｈｒｃ１）可能在肝脏疾病尤其是肝纤维化中发挥重要作用，但对肝星状 细胞增殖的影响尚未完全阐明。目的：研究Ｃｔｈｒｃ１对肝星状细胞增殖的影响。方法：构建Ｃｔｈｒｃ１重组腺病毒载体， 通过尾静脉注射小鼠体内，以实时ＰＣＲ和蛋白质印迹法分别检测Ｃｔｈｒｃ１ｍＲＮＡ和蛋白表达。通过胆总管结扎和 ３，５二乙氧基羰基１，４二氢２，４，６三甲基吡啶（ＤＤＣ）饲料喂养分别构建小鼠肝纤维化模型，分别尾静脉注射Ａｄ Ｃｔｈｒｃ１或ＡｄＧＦＰ，以免疫荧光法检测肝星状细胞数量。结果：成功构建 Ｃｔｈｒｃ１重组腺病毒载体；实时ＰＣＲ和蛋白 质印迹法证实尾静脉注射ＡｄＣｔｈｒｃ１后小鼠肝内Ｃｔｈｒｃ１ｍＲＮＡ和蛋白表达均较对照组增高。ＨＥ和Ｍａｓｓｏｎ染色示 成功建立了小鼠肝纤维化模型。免疫荧光法显示Ｃｔｈｒｃ１过表达能明显抑制肝纤维化模型小鼠肝星状细胞的增殖。 结论：成功构建了重组腺病毒载体ＡｄＣｔｈｒｃ１并可在体内高效稳定表达，能抑制肝星状细胞的增殖，有望成为肝纤 维化的治疗靶点。 关键词　胶原三螺旋重复蛋白１；　腺病毒载体；　肝星状细胞；　细胞增殖；　肝硬化 １ ２ １ １ Ｃｔｈｒｃ１ＩｎｈｉｂｉｔｓＰｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＨｅｐａｔｉｃＳｔｅｌｌａｔｅＣｅｌｌｓｉｎＭｉｃｅ　ＺＨＯＮＧＷｅｉ，ＢＩＡＮＺｈａｏｌｉａｎ，ＭＡＸｉｏｎｇ．Ｄｉｖｉｓｉｏｎ ｏｆＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙａｎｄＨｅｐａｔｏｌｏｇｙ，ＲｅｎＪｉＨｏｓｐｉｔａｌ，ＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＳｈａｎｇｈａｉＪｉａｏＴｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ；ＳｈａｎｇｈａｉＩｎｓｔｉｔｕｔｅ ２ ｏｆＤｉｇｅｓｔｉｖｅＤｉｓｅａｓｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ（２００００１）；ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，ＮａｎｔｏｎｇＴｈｉｒｄＰｅｏｐｌｅ’ｓＨｏｓｐｉｔａｌ；Ｎａｎｔｏｎｇ ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＬｉｖｅｒＤｉｓｅａｓｅ，Ｎａｎｔｏｎｇ，ＪｉａｎｇｓｕＰｒｏｖｉｎｃｅ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅｔｏ：ＭＡＸｉｏｎｇ，Ｅｍａｉｌ：ｍａｘｉｏｎｇｍｄ＠１６３．ｃｏｍ 　　Ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ：Ｃｏｌｌａｇｅｎｔｒｉｐｌｅｈｅｌｉｘｒｅｐｅａｔｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ１（Ｃｔｈｒｃ１）ｈａｓｂｅｅｎｒｅｐｏｒｔｅｄｐｌａｙｉｎｇａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅ ｉｎｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓ，ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙｉｎｌｉｖｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓ，ｈｏｗｅｖｅｒ，ｉｔｓｅｆｆｅｃｔｏｎｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌｓｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｓｎｏｔｆｕｌｌｙｃｌｅａｒ． Ａｉｍｓ：ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＣｔｈｒｃ１ｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ ｖｅｃｔｏｒｏｆＣｔｈｒｃ１ｗａｓｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ．ＡｆｔｅｒｉｎｊｅｃｔｉｎｇＡｄＣｔｈｒｃ１ｔｈｒｏｕｇｈｔａｉｌｖｅｉ