单克隆抗体亲和层析法纯化重组溶葡萄球菌酶 - 上海高科生物工程有限 .pdf

生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2009, January 25; 25(1): 147-151 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn © 2009 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved 生物技术与方法 单克隆抗体亲和层析法纯化重组溶葡萄球菌酶 1 1 1 2 黄晋江 , 吴宏宇 , 张继恩 , 黄青山 1 上海高科联合生物技术研发有限公司, 上海 201206 2 复旦大学生命科学学院遗传学研究所 遗传工程国家重点实验室, 上海 200433 摘 要: 溶葡萄球菌酶能够特异性杀灭金黄色葡萄球菌且不易产生耐药性, 有望成为治疗葡萄球菌属细菌引发感染的 特效药物。为获得高纯度的重组溶葡萄球菌酶以达到药用标准, 本研究构建了一种以重组溶葡萄球菌酶单克隆抗体为配 体的亲和层析纯化方法。纯化后的重组溶葡萄球菌酶纯度大于 95%, 得率大于 90%, 即使重复使用30 多次, 纯化效率 不变。且经比色法鉴定纯化后的重组溶葡萄球菌酶仍具有良好的活性。该方法步骤简单, 纯化效果好, 为生产高纯度重 组溶葡萄球菌酶奠定了基础。 关键词: 溶葡萄球菌酶, 单克隆抗体, 亲和层析 Purification of recombinant lysostaphin by monoclonal antibody affinity chromatography 1 1 1 2 Jinjiang Huang , Hongyu Wu , Jien Zhang , and Qingshan Huang 1 Shanghai Hi-tech United Bio-technological Research Development Co. Ltd, Shanghai 201206, China 2 State Key Laboratory of Genetic Engineering, Insititute of Genetics , School of Life Science, Fudan University, Shanghai 200433, China Abstract: Lysostaphin, a specific endopeptidase enzyme derived from Staphylococcus aureus, is a bactericidal agent against Staphylococcus and difficult to be drug-resistant. This study established the monoclonal antibody affinity chromatography to obtain lysostaphin of high purity for drug-use standard. The purified Lysostaphin was of 95% purity and its recovery rate more than 90%. Moreover, the affinit