黄豆豆渣中脲酶的提取精制及其影响因素研究 - 生物技术进展.pdf

生物技术进展 ２０１７年　 第７卷　 第３期　 ２５３~２５７ 研究论文 Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　 ＩＳＳＮ２０９５￣２３４１ Ａｒｔｉｃｌｅｓ 黄豆豆渣中脲酶的提取精制及其影响因素研究 １ １ ２ ２ ３ 张铁军 ꎬ　 施圆圆 ꎬ　 孔令漪 ꎬ　 曹蓝霄 ꎬ　 周嘉青 １.广州医科大学生命科学学院ꎬ广州 ５１１４３６ꎻ ２.广州医科大学第三临床学院ꎬ广州 ５１１４３６ꎻ ３.广州医科大学南山学院ꎬ广州 ５１１４３６ 摘　 要: 为拓展脲酶的国产化途径ꎬ对黄豆豆渣中脲酶的提取进行了研究ꎮ 建立了从黄豆豆渣中提取脲酶的全套流程ꎬ 利用盐析法和有机溶剂沉淀法ꎬ通过浸提及离心等试验操作手段ꎬ将黄豆豆渣中的脲酶进行提取精制ꎬ产率为０.１％ꎮ 同 时确定了脲酶的最佳提取条件:其最佳浸提温度为５０℃ꎬ最佳丙酮浓度为５０％ꎬ最适ｐＨ为７.０ꎮ 利用纳氏试剂比色法的 －２ × 原理ꎬ测得该脲酶在最佳实验条件下的米氏常数Ｋ 值为４.１１ １０ ｍｏｌ/ Ｌꎬ１ｍＬ脲酶溶液中的酶活力为１８.６３Ｕꎮ 从黄豆 ｍ 豆渣中提取脲酶ꎬ既可解决脲酶的国产化问题ꎬ又可提高黄豆豆渣的附加值ꎬ研究结果具有良好的工业价值和经济效益ꎮ 关键词: 黄豆豆渣ꎻ脲酶ꎻ酶活力ꎻＫ ꎻ酶活影响因素 ｍ ＤＯＩ:１０.１９５８６/ｊ.２０９５￣２３４１.２０１７.０００５ Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｆａｃｔｏｒｓ Ａｆｆｅｃｔｉｎｇ Ｅｎｚｙｍｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｕｒｅａｓｅ ｆｒｏｍ Ｓｏｙｂｅａｎ Ｄｒｅｇｓ １ １ ２ ２ ３ ＺＨＡＮＧＴｉｅｊｕｎ ꎬＳＨＩ Ｙｕａｎｙｕａｎ ꎬＫＯＮＧ Ｌｉｎｇｙｉ ꎬＣＡＯ Ｌａｎｘｉａｏ ꎬＺＨＯＵＪｉａｑｉｎｇ １.ＧＭＵ￣ＧＩＢＨ Ｊｏｉｎｔ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｌｉｆｅ ＳｃｉｅｎｓｅꎬＧｕａｎｇｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＧｕａｎｇｚｈｏｕ ５１１４３６ꎬＣｈｉｎａꎻ ２.Ｔｈｅ Ｔｈｉｒｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ＳｃｈｏｏｌꎬＧｕａｎｇｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＧｕａｎｇｚｈｏｕ ５１１４３６ꎬＣｈｉｎａꎻ ３.Ｎａｎｓｈａｎ ＳｃｈｏｏｌꎬＧｕａｎｇｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＧｕａｎｇｚｈｏｕ ５１１４３６ꎬＣｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｔｈｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｕｒｅａｓｅｆｒｏｍ ｓｏｙｂｅａｎ ｄｒｅｇｓｗａｓ ｃａｒｒｉｅｄ ｏｕｔ ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｅｘｐａｎｄｔｈｅｗａｙ ｏｆ ｕｒｅａｓｅ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ. Ｔｈｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｈａｄ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ａｆｕｌｌ ｓｅｔ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｕｒｅａｓｅ ｆｒｏｍ ｓｏｙｂｅａｎ ｄｒｅｇｓ. Ｂｙ ｕｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｓａｌｔｉｎｇ ｏｕｔ ａｎｄ ｏｒｇａｎｉｃ ｓｏｌｖｅｎｔ ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎꎬ ｔｈｅ ｕｒｅａｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ｓｏｙｂｅａｎ ｄｒｅ