组蛋白去乙酰化酶抑制剂联合吉西他滨对骨肉瘤mg-63 - tumor - 肿瘤.pdf

520 　　肿瘤2013 年6 月第33 卷第6 期　TUM OR Vol. 33, J une 2013 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2013.06.007 Copyright© 2013 by TUM OR Basic Research 基础研究 · 组蛋 白去 乙酰化酶抑制剂联合吉西他滨对骨 肉瘤MG-63细胞抑制作 用的研究 胡旭昌，王栓科，康学文，汪　静，安丽萍，夏亚一，狄天宁，马靖琳，王翠芳，胡杰亮 兰州大学第二医院骨科，甘肃省骨关节疾病研究重点实验室，甘肃兰州　730030 [ 摘要 ]　目的：研究组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase ，HDAC ）抑制剂MGCD0103 和吉西他滨（gemcitabine ） 单药或联合作用对体外培养的人骨肉瘤细胞株MG-63 生长的影响，并探讨其可能的作用机制。方法：体外传代 培养人骨肉瘤MG-63 细胞，将不同浓度的MGCD0103 （1、10 和100 µmol/L ）和吉西他滨 （0.1、0.2 和0.4 mg/L ）分别单独或联合作用于MG-63 细胞；采用MTT 法检测2 种药物单药或联合作用对MG-63 细胞的生 长抑制作用，并观察其有效的作用浓度；在荧光显微镜下观察细胞的凋亡情况；实时荧光定量-PCR （real-time fluorogenic quantitative-PCR ，RFQ-PCR ）检测MG-63 细胞中转移相关基因1 （metastasis-associated gene 1， MTA 1 ）mRNA 表达的变化，蛋白质印迹法检测p2 1、Bax 及血管内皮生长因子 （vascular endothelial growth factor ，VEGF ）表达水平的变化。结果：MGCD0103 和吉西他滨单药或联合作用都能明显抑制MG-63 细胞 的生长 （ P ＜0.05 ），并呈剂量依赖性，MGCD0103 和吉西他滨具有协同作用。荧光显微镜下观察结果显示， MGCD0103 和吉西他滨单药或联合作用于MG-63 细胞后，大量具有凋亡形态特征的细胞出现，凋亡细胞数明 显增多；RFQ-PCR 和蛋白质印迹法检测结果分别显示，MTA 1 mRNA 及VEGF 蛋白的表达量明显下调，而 p2 1 和Bax 蛋白的表达量明显上调。结论：MGCD0103 和吉西他滨通过诱导细胞凋亡及抑制细胞增殖而发挥体 外抗骨肉瘤作用，其作用机制涉及细胞周期和凋亡相关基因表达的调控。MGCD0103 和吉西他滨具有协同作用， 有望成为治疗骨肉瘤治疗的一种新手段。 [ 关键词 ]　骨肉瘤；组蛋白脱乙酰化酶类；吉西他滨；抗肿瘤联合化疗方案；MG-63 细胞 [中图分类号]　R733.3 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431 (2013) 06-0520-06 Experimental study of MGCD0103 in combination with gemcitabine inhibiting the growth of human osteosarcoma MG-63 cells in vitro HU Xu-chang, WANG Shuan-ke, KANG Xue-wen, WANG Jing, AN Li-ping, XIA Ya-yi, DI Tian-ning, MA Jing-lin, WANG Cui-fang, HU Jie-liang Department of Orthopaedics, Orthopaedic Key Laboratory of Gansu Province, Second Hospital of Lanzhou University, Lanzhou 730030, Gansu Province, China [A BST RA CT]　Objective: To investiga