肉桂酸衍生物对铜绿假单胞菌pao1 iii 型分泌系统的影响.pdf

微生物学通报 Oct. 20, 2014, 41(10): 2061−2069 Microbiology China © 2014 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130898 研究报告 肉桂酸衍生物对铜绿假单胞菌PAO1 III 型分泌系统的影响 1△ 2△ 2 2 1 1* 2* 单金明 吴小刚 袁小琛 方力为 梁翠荣 陈新 YANG Ching-Hong (1. 213164) (2. Department of Biological Sciences, University of Wisconsin-Milwaukee, Wisconsin 53211, USA) 摘 要【目的】铜绿假单胞菌是引起医院获得性感染最常见的条件致病菌，而III 型分泌系统 (Type III secretion system ，TTSS)是其致病的主要因子之一。本文从合成的21 个肉桂酸衍生物 中筛选影响TTSS 效应子(Effector)产生的化合物，并初步研究其作用机制。【方法】将TTSS 效 应子合成基因exoS 的转录报告质粒pAT-exoS 转入菌株PAO1 中，获得PAO1(pAT-exoS) 。待筛 选的化合物与PAO1(pAT-exoS)菌株共培养6 h 后，检测exoS 基因的表达，从中筛选影响exoS 基因表达的化合物。【结果】筛选结果表明：21 个化合物中，3 个化合物抑制exoS 基因表达， 2 个化合物则促进exoS 基因表达。此外，化合物TS128 、TS143 和TS160 对菌株生长有明显的 抑制作用。Western blot 实验进一步证实筛选得到的化合物TS108 、TS128 和TS165 可抑制ExoS 的产生；化合物TS139 和TS143 则促进ExoS 的产生。为进一步研究抑制剂的作用机理，过量 表达TTSS 主要的调控因子exsA 基因可部分消除抑制剂TS108 和TS165 的抑制效果；而rsmZ rsmY 双基因突变体PAO6421 中添加抑制剂TS108 和TS165 并不能显著抑制exoS 基因的表达， 同样，抑制剂TS108 和TS165 也不影响受 Gac/Rsm 信号传导系统调控的群体感应信号分子的 产生。【结论】抑制剂TS108 和 TS165 的作用机制可能主要是影响esxA 基因，从而影响 exoS 基因表达及蛋白产量。 关键词Pseudomonas aeruginosa ，ExoS ，抑制剂，诱导剂，III 型分泌系统 The influence of cinnamic acid derivatives on the type III secretion system of Pseudomonas aeruginosa PAO1 1△ 2△ 2 2 SHAN Jin-Ming WU Xiao-Gang YUAN Xiao-Chen FANG Li-Wei LIANG Cui-Rong1 CHEN Xin1* YANG Ching-Hong2* (1. School of Pharmaceutical and Life Sciences, Changzhou University, Changzhou, Jiangsu 213164, China) (