酸土脂环酸芽孢杆菌可溶性全细胞蛋白提取工艺优化 - 农业机械学报.pdf

２０１２年 ６月 农 业 机 械 学 报 第 ４３卷第 ６期 ＤＯＩ：１０．６０４１／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００１２９８．２０１２．０６．０２６ 酸土脂环酸芽孢杆菌可溶性全细胞蛋白提取工艺优化 袁亚宏　刘晓珂　岳田利　高振鹏 （西北农林科技大学食品科学与工程学院，陕西杨凌７１２１００） 　　【摘要】　研究了超声波破碎法、ＳＤＳ沸水浴、溶菌酶和细胞裂解液处理对酸土脂环酸芽孢杆菌破碎和可溶性 全细胞蛋白提取效果的影响，并采用 ＳＤＳ ＰＡＧＥ电泳进行蛋白成分分析，通过单因素试验和响应面法对可溶性全 细胞蛋白的提取工艺条件进行了分析与优化。结果表明：细胞裂解液处理提取效果最好；细胞裂解液处理参数对 全细胞蛋白提取量有显著影响，因素影响主次顺序为液料比、处理时间、处理温度；细胞裂解液处理优化工艺参数 为：处理时间３７４ｍｉｎ、处理温度１８９℃和液料比２７０ｍＬ／ｇ，可溶性全细胞蛋白提取量达到１６１１８ｍｇ／ｇ。试验所 ２ 得可溶性全细胞蛋白提取回归模型高度显著（Ｒ ＝０９８９２），拟合性好，可用于预测。 关键词：酸土脂环酸芽孢杆菌　可溶性全细胞蛋白　ＳＤＳ ＰＡＧＥ　细胞裂解液　工艺参数　响应面 中图分类号：ＴＳ２０１３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１０００１２９８（２０１２）０６０１３９０８ ＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆＳｏｌｕｂｌｅＷｈｏｌｅｃｅｌｌＰｒｏｔｅｉｎＥｘｔｒａｃｔｉｏｎｆｒｏｍ Ａｌｉｃｙｌｏｂａｃｉｌｌｕｓａｃｉｄｏｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ ＹｕａｎＹａｈｏｎｇ　ＬｉｕＸｉａｏｋｅ　ＹｕｅＴｉａｎｌｉ　ＧａｏＺｈｅｎｐｅｎｇ （ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＮｏｒｔｈｗｅｓｔＡ＆ＦＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ，Ｓｈａａｎｘｉ７１２１００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｔ Ｔｈｅｙｉｅｌｄｏｆｓｏｌｕｂｌｅｗｈｏｌｅｃｅｌｌｐｒｏｔｅｉｎｆｒｏｍ ＡｌｉｃｙｌｏｂａｃｉｌｌｕｓａｃｉｄｏｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓＤＳＭ３９２２ ｃｅｌｌｓｉｓ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｏｎｔｈｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓｏｆｃｅｌｌｌｙｓｉｓｐｏｓｔｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ．Ｖａｒｉｏｕｓｃｅｌｌｌｙｓｉｓａｐｐｒｏａｃｈｅｓｗｅｒｅ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ，ＳＤＳ，ｂｏｉｌｉｎｇ，ｌｙｓｏｚｙｍｅ，ａｎｄｃｅｌｌｌｙｓｉｓｒｅａｇｅｎｔｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ａｎｄｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓａｍｐｌｅｓｏｆｓｏｌｕｂｌｅｐｒｏｔｅｉｎｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＳＤＳｐｒｏｔｅｉｎｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ． Ｔｈｅｓｏｌｕｂｌｅｗｈｏｌｅｃｅｌｌｐｒｏｔｅｉｎｂｙｏｎｅｆａｃｔｏｒａｔａｔｉｍｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓａｎｄｒｅｓｐｏｎｓｅｓｕｒｆａｃｅｍｅｔｈｏｄｗａｓ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｃｅｌｌｌｙｓｉｓｒｅａｇｅｎｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｗａｓｔｈｅｍｏｓｔｅｆｆｅｃｔｉｖｅｉｎｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｓｏｌｕｂｌｅｗｈｏｌｅｃｅｌｌｐｒｏｔｅｉｎ．Ｔｈｅｍｏｓｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｐａｒａｍｅｔｅｒｓ，ｎａｍｅｌｙｉｎｃｕｂａｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ， ｒｅａｃｔｉｏｎｔｉｍｅ，ａｎｄｔｈｅｒａｔｉｏｏｆｃｅｌｌｌｙｓｉｓｒｅａｇｅｎｔｖｏｌｕｍｅａｎｄｂａｃｔｅｒｉａｗｅｉｇｈｔ（Ａ／Ｂｒａｔｉｏ），ｗｅｒｅｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｂｙｕｓｉｎｇｔｈｅＢｏｘＢｅｈｎｋｅｎｗ