猪精子获能前后细胞亚组分蛋白分离及酪氨酸磷酸化 - 畜牧兽医学报.pdf

畜牧兽医学报 ， （）： ２０１２４３８ １３１０１３１６ 　 犃犮狋犪犞犲狋犲狉犻狀犪狉犻犪犲狋犣狅狅狋犲犮犺狀犻犮犪犛犻狀犻犮犪 猪精子获能前后细胞亚组分蛋白分离及 酪氨酸磷酸化蛋白的鉴定 胡启蒙，张媛媛，陈振亮，王亮亮，李新红 （上海交通大学农业与生物学院 上海市兽医生物技术重点实验室，上海 ２００２４０） 摘 要：本研究对猪精子获能前后细胞亚组分蛋白进行分离以及对酪氨酸磷酸化蛋白进行鉴定，旨在为哺乳动物 　 精子受精生物学研究奠定理论基础。利用动物精子体外获能培养、细胞亚组分分离技术及蛋白免疫印迹的方法， 分离猪精子细胞亚组分蛋白及酪氨酸磷酸化蛋白鉴定。结果表明，猪精子经过获能培养后各项活力指标均得到显 著提高，且与精子蛋白发生酪氨酸磷酸化修饰密切相关；获能精子中 、 、 的高分子量蛋白磷酸化程度明 ｕ 显高于未获能精子；分子质量约为 、 、 的膜蛋白及 胞浆蛋白发生酪氨酸磷酸化，其中 、 的膜 ２５４７５０ｋｕ ４７ｋｕ ２５４７ｋｕ 蛋白酪氨酸磷酸化程度显著高于未获能精子（ ）；分子量约为 、 、 的核蛋白发生酪氨酸磷酸 犘 ０．０５ ２３３７４２ ５０ｋｕ ＜ ～ 化，获能精子中 的核蛋白酪氨酸磷酸化程度显著高于未获能精子（ ）。结果提示，猪精子细胞不同亚 ２３ｋｕ 犘 ０．０５ ＜ 组分中，发生酪氨酸磷酸化修饰的蛋白以膜蛋白及核蛋白为主，同时有少量的胞浆蛋白。 关键词：猪；精子获能；酪氨酸磷酸化 中图分类号： ； 文献标识码： 文章编号： （ ） Ｑ５１Ｓ８１４．１ Ａ ０３６６６９６４２０１２０８１３１００７ 　　　　 　　　　 犛犲犪狉犪狋犻狀 犛狌犫犮犲犾犾狌犾犪狉犘狉狅狋犲犻狀狊犻狀犝狀犮犪犪犮犻狋犪狋犻狅狀犪狀犱犆犪犪犮犻狋犪狋犻狅狀狅犳犅狅犪狉 狆 犵 狆 狆 犛犲狉犿犆犲犾犾狊犪狀犱犐犱犲狀狋犻犳犻狀 狋犺犲犜狉狅狊犻狀犲犘犺狅狊犺狅狉狅狋犲犻狀 狆 狔 犵 狔 狆 狆  ， ， ， ， ＨＵＱｉｍｅｎ ＺＨＡＮＧＹｕａｎｕａｎ ＣＨＥＮＺｈｅｎｌｉａｎ ＷＡＮＧＬｉａｎｌｉａｎ ＬＩＸｉｎｈｏｎ ｇ ｙ ｇ ｇ ｇ ｇ （ ， ， 犛犺犪狀犺犪犻犓犲犔犪犫狅狉犪狋狅狉 狅 犞犲狋犲狉犻狀犪