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全国流感监测技术指南要点解析 山东省疾病预防控制中心病毒病所 电话:053182679461 E-mail:crbfzs@ 所有讲课PPT都将放在我们公共邮箱里: 邮箱名:crbfzs@163.com 密码:crbfzs 内容 监测目的 流感样病例监测 流感样病例暴发疫情监测 一、监测目的 监测流感活动水平和流行动态; 及时发现流感病毒变异并做出预警; 为全球及我国流感疫苗毒株的预测和推荐提供依据。 二、流感样病例监测 监测对象和时间 监测对象:流感样病例,即发热(体温≥38℃),伴咳嗽或咽痛之一者。 监测时间 :所有国家级流感样病例监测哨点医院和流感监测网络实验室均全年开展流感样病例监测。 监测诊室的设置 城市综合医院在内科门诊、内科急诊、发热门诊和(或)儿内科门诊、儿内科急诊开展流感样病例的监测;内科门诊开展流感样病例监测的诊室应包括所有内科诊室和感染性疾病科。 注:包括监测哨点医院设置的发热门诊和感染性疾病科。 城市儿童医院在儿内科门诊、儿内科急诊和(或)发热门诊开展流感样病例的监测。 不能仅将发热门诊设为监测诊室 流感样病例的报告 哨点医院监测诊室的医务人员,按照流感样病例的定义,每天按科室登记各年龄组的流感样病例数和门急诊病例就诊总数,由哨点医院主管科室每日收集、汇总后,于每周一将本院各监测诊室上周数据录入到“中国流感监测信息系统”。 各市疾控中心每周一15时之前对本辖区监测哨点医院报告的数据进行审核,并将数据汇总后传真至省疾控中心。 流感样病例数和门急诊病例就诊总数在每个监测诊室的产生来源必须一致。 流感样病例标本的采集 北方省份每家哨点医院在4-9月份每月采集5-15份流感样病例标本,10月-次年3月每周采集10-15份流感样病例标本。应避免集中、突击采样。 采样对象:发病3天内的流感样病例。 标本采集种类包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽拭子。标本采集后放入含3-4ml采样液的采样管中。 流感样病例标本运送 标本采集后在保证生物安全条件下在48h内运送至相应的流感监测网络实验室,保存温度为4℃以下;如未能48h内送至实验室的,应置-70℃或以下保存,并应保证采集的标本1周内送到对应的网络实验室。标本应避免反复冻融。 全国流感监测网络实验室的工作人员接到标本后,48h内将“流感样病例标本原始登记送检表”录入到“中国流感监测信息系统”中。 流感样病例实验室检测 生物安全:BSL-2级及以上实验室 具备病毒分离能力的实验室:利用状态良好的MDCK细胞进行病毒分离。MDCK细胞病毒分离阳性再用鸡胚进行病毒分离。 ?不具备病毒分离能力的实验室:收到标本后1周内利用核酸检测方法进行流感病毒亚型鉴定。 检测结果在检测完成后48h内录入“中国流感监测信息系统”。 核酸检测的及时性 目前多采用鸡胚和MDCK细胞进行流感病毒分离。通过鸡胚分离的流感毒株与原始标本的抗原性和基因特性可能会有所不同,而通过MDCK细胞所分离的流感病毒与原始标本相似。且MDCK细胞对“O”相毒株的敏感性远高于鸡胚,故MDCK细胞已成为流感病毒分离不可缺少的一种宿主系统。但目前全球主要使用鸡胚进行流感疫苗生产,MDCK细胞分离的病毒在很多国家尚未批准用于疫苗生产,因此鸡胚分离仍然发挥着举足轻重的作用。 流感样病例实验室检测 标本处理:收到标本后,24小时内进行标本处理和病毒分离,将原始标本分为三份,一份接种MDCK细胞接种,一份鸡胚接种,一份-70℃或以下温度保存待复核; 标本集中、收获和鉴定:培养1次的阴性标本可不再进行盲传,对血凝滴度小于1:16的毒株,稀释后进行传代。 流感样病例实验室检测 各网络实验室将分离到的所有符合上送标准的流感毒株,同时上送国家流感中心和省级疾病预防控制中心?。标本采集到送至国家流感中心的时间不超过1个月。 注:上送标准:HA≥1:16,血凝抑制试验分型,量不低于5.5毫升(国家3毫升,省疾控中心2.5毫升) 每个开展病毒分离的网络实验室向国家流感中心上送流感毒株数量每年不低于30株,流行季节每月不少于5株。 省级参比中心评估方案要求 省(区、市)内2/3的网络实验室开展流感病毒分离工作;全省(区、市)连续2年每家开展流感病毒分离的网络实验室每年送国家流感中心的毒株不少于30株;全省(区、市)连续2年送国家流感中心的毒株复核一致率在90%以上。 流感样病例实验室检测 毒株保存:液体毒株可在-70℃或以下温度保存3年,冻干保存毒株可在4 ℃及以下温度条件长期保存,各网络实验室对分离出病毒株的原始标本应在-70℃及以下温度保存至少6个月。 各网络实验室对HA阳性不能区分型别或亚型的毒株和阳性标本务必在48小时内送至国家流
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