生物化学与分子生物学实验指导（补充讲义） - 生物探索.pdf

生物化学与分子生物学实验指导 （补充讲义） 实验教学的组织与实施 南方医科大学 生物化学与分子生物学实验教学中心 二O 一一年九月 目 录 第1 章 实验讨论题 ………………………………………………… ………1 第2 章 实验报告的要求………………………………………………………7 第3 章 实验操作考核的要求…………………………………………………12 第4 章 设计性实验教学的组织实施…………………………………………16 一、目的要求 二、组织实施 三、设计性实验要求 四、实验设计书格式要求 五、实验设计书范例 六、历届广东大学生生物化学实验技能大赛获奖项目 第一章 实验讨论题 实验1-1 蛋白质的定量测定 （微量凯氏定氮法） 1．用微量凯氏定氮法测定蛋白质含量时，为什么要做空白管测定？消化、蒸馏和滴定 过程中各应注意什么问题？ 2．使用本测定法时产生误差的可能原因有哪些？ 实验1-2 蛋白质的定量测定 （双缩脲法） 1．干扰本实验的因素有哪些？ 2．用双缩脲法测定血浆总蛋白浓度时，所用的试剂和仪器能否含有铵盐？为什么？ 实验1-3 蛋白质的定量测定 （Folin-酚试剂法） 1．若所测得样品的浓度低于实际值，可能会有哪些影响因素？ 2．该方法有什么优缺点？ 实验1-4 蛋白质的定量测定 （BCA 法） 1．比较BCA 法与双缩脲法、Lowry 法有何异同？ 2．BCA 法常用于科研，其有哪些特点？ 实验1-5 蛋白质的定量测定 （考马斯亮蓝染色法） 根据下列所给的条件和要求，选择一种或几种常用蛋白质定量方法测定蛋白质的浓度： （1 ） 样品不易溶解，但要求结果较准确。 （2 ） 要求在半天内测定 60 个样品。 （3 ） 要求很迅速地测定一系列试管 （30 支 ）中溶液的蛋白质浓度。 实验1-6 蛋白质的定量测定 （紫外吸收法） 1．若样品中含有核酸类杂质，应如何校正？ 2．用紫外吸收法测定蛋白质含量有何优缺点？易受哪些因素的影响？测定时能否用玻 璃比色杯？为什么？ 实验2 蛋白质相对分子量测定 （SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳） 1．在不连续体系 SDS中, 当分离胶加完后,需在其上加一层水,为什么? 2．电极缓冲液中甘氨酸的作用? 3．在不连续体系 SDS中,分离胶与浓缩胶中均