半滑舌鳎富含亮氨酸的g 蛋白偶联受体基因( lgr8 - 黄海水产研究所.pdf

Online system: 农 业 生 物 技 术 学 报 Journal of Agricultural Biotechnology 2015, 23(9): 1188~1195 DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.09.008 半滑舌鳎富含亮氨酸的G 蛋白偶联受体基因(LGR8) 的分子克隆和 表达分析 1,3 1,2* 1 1 1 1 1 吴娅红 陈松林 刘肖峰 董忠典 张宁 于洋 修旺姗 1 中国水产科学研究院黄海水产研究所，青岛266071 ；2 海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室，青岛 266071 ；3 上海海洋大学水产与生命学院，上海201306 *通讯作者，chensl@ 摘 要 富含亮氨酸的G 蛋白偶联受体(leucine rich repeat containing G protein coupled receptor 8, LGR8) 在哺乳类动物雄性精巢下降过程中起重要作用。本研究在前期完成的半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)全 基因组测序与转录组测序的基础上，通过RACE 方法克隆得到半滑舌鳎LGR8基因(GenBank 登录号： KP749830) ，该基因全长2 768 bp ， 开放阅读框(open reading frame, ORF)为2 205 bp ， 编码734 个氨基酸，5- 非翻译区(untranslated regions, UTR)为272 bp ，3-UTR 为296 bp 。氨基酸序列中含有10 个LRRs 区域、1 个LDL-A 区域和1个7tm-1 结构域。实时定量PCR(Real-time quantitative PCR, qRT-PCR)结果显示，在3 龄性成熟鱼体中LGR8主要在雄鱼脑和性腺中表达，且显著高于其他组织(P＜0.05) ；在雌鱼各组织中均有 表达，但是大多数组织(除肠和心脏) 中表达量无显著差异；在雄鱼性腺和脑中的表达量要显著高于雌鱼 (P＜0.05) 。对雄鱼不同时期的性腺进行qRT-PCR 检测结果显示，LGR8基因在鱼体发育80 d 表达量开始 上升，150~210 d表达量达到最大，且显著高于其他组织(P＜0.05) 。研究表明LGR8可能在半滑舌鳎性别 决定和性腺发育中起一定作用，为半滑舌鳎性别决定机制的研究提供了一定的理论基础。 关键词 半滑舌鳎，富含亮氨酸的G 蛋白偶联受体基因(LGR8) ，实时荧光定量PCR(qRT-PCR) ，性别分化 Molecular Cloning and Expression Analysis of Leucine Rich Repeat Containing G Protein Coupled Receptor 8 Gene (LGR8) in Half-smooth Tongue Sole (Cynoglossussemilaevis) WU Ya-Hong1,3 CHEN Song-Lin1,2* LIU Xiao-Feng1 DONG Zhong-Dian1 ZHANG Ning1 YU Yang1 XIU Wang-Shan1 1 Scientific Research Institute of China, The Yellow Sea Fisheries Research Institute, Qingdao 266071, China; 2 Function Laboratory for Marine Fisheries Science and Food Production Processes, National Laboratory for Ocean Science and Technology, Qingdao 266071, China; 3 College of Fisheries and L