包涵体蛋白的复性研究进展 - 安徽农业科学.pdf

安徽农业科学袁允燥怎则灶葬造 燥枣 粤灶澡怎蚤粤早则蚤援杂糟蚤援圆园园8袁36渊14冤院5801-5803 责任编辑 张杨林 责任校对 卢瑶 包涵体蛋白的复性研究进展 ， 1 2 1 1 1 1 夏启玉 ，肖苏生 ，邓柳红 ，易小平 ，张春发 （中国热带农业科学院热带生物技术研究所，海南海口 ；海南大学农学院，海南儋州 ） 1. 571101 2. 571737 摘要 介绍了包 体的洗涤、变性溶解和传统的复性方法，详细阐述了包 体蛋白的层析复性方法以及复性过 中的添加剂效果。 关键词 包 体；变性；层析复性；添加剂 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） Q78 A 0517-6611 2008 14-05801-03 Research Progress in Renaturation of Inclusion Body Protein XIA Qi yu et al (Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Haikou, Hainan 571101) Abstract The washing, denaturation and renaturation methods of inclusion body were introduced. Chromatography renaturation method of inclusion body protein was expatiated as well as the additive impact during the process of renaturation. Key words Inclusion body; Denaturation; Chromatography renaturation; Additive [1] 基因工程技术的飞速发展为大规模生产目标蛋白质提 （ ）溶解抗真菌重组肽的包涵体 。高 值（ ）结合 85 益 pH 逸12 供了可能，大肠杆菌因其易于操作、遗传背景清楚、发酵成 低浓度的变性剂 （如 异丙基或 丙基乙醇溶液） 20%耀40% n [2] 本低和蛋白表 水平高等优点，成为生产重组蛋白的首选 用于溶解生长激 包涵体非常有效 。由于蛋白间二硫键的 表达系统。外源基因在大肠杆菌中的高表 常常导致包涵 存在，在增溶时一般要使用还原剂。还原剂的使用浓度一般 体的形成，包涵体易于分离纯化，并能避免蛋白酶对外源蛋 为50耀100 mmol/L 2蛳茁ME 或DTT。 白的降解，但包涵体不溶且无生物学活性。因此，如何高效 3 包涵体的复性 地复性包涵体蛋白是基因工程技术面临的一个难