高质量木薯根、茎、叶总rna 和总蛋白样品的制备方法methods of .pdf

分子植物育种(网络版), 2011 年, 第9 卷, 第1492-1496 页 Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2011, Vol.9, 1492-1492 http://mpb. 技术改进 Upgrade Technology 高质量木薯根、茎、叶总RNA 和总蛋白样品的制备方法 1,2 1,2 1 1 3 1,2 施涯邻 , 王金子 , 王志强 , 蒙姣荣 , 罗兴录 , 陈保善 1.亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室, 南宁, 530004 2.广西大学生命科学与技术学院, 南宁, 530004 3.广西大学农学院, 南宁, 530004 通讯作者: chenyaoj@ 作者 分子植物育种, 201 1 年, 第9 卷, 第67 篇 doi: 10.5376/.201 1.09.0067 收稿日期：2011 年05 月10 日 接受日期：2011 年05 月21 日 发表日期：2011 年05 月31 日 这是一篇采用Creative Commons Attribution License 进行授权的开放取阅论文。只要对本原作有恰当的引用, 版权所有人允许并同意第三方无条 件的使用与传播。 引用格式： 施涯邻等, 2011, 高质量木薯根, 茎, 叶总RNA 和总蛋白样品的制备方法, 分子植物育种 Vol.9 No.67 (doi: 10.5376/.2011 .09.0067) 摘 要 木薯是一种重要的粮食作物和能源植物。为了研究木薯转录组和蛋白组，本研究以块根膨大期木薯品种华南 124 为材料，探索适合木薯块根、茎、叶的总RNA 和总蛋白样品的制备方法。将高浓度氯化锂沉淀和酚氯仿抽提相结合，所获 得的高纯度总RNA 能够满足构建木薯cDNA 文库的要求；将SDS 提取缓冲液和TCA-丙酮法相结合，能够提取得到适合双 向电泳的高纯度蛋白质样品。这些方法的建立，为进行大规模木薯转录组学和蛋白组学研究奠定了基础。 关键词 木薯; 总RNA; 总蛋白; cDNA 文库; 双向电泳 Methods of Preparation of High Quality Total RNA and Total Protein From Cassava tissues of Root, Stem, and Leaves Shi Yalin 1,2 , Wang Jinzi 1,2 , Wang Zhiqiang 1 , Meng Jiaorong 1 , Luo Xinglu 3 , Chen Baoshan 1,2 1. State Key Laboratory for Conversation and Utilization of Subtropical Agro-bioresources, Nanning, 530004, P.R. China 2. College of Life Science and Technology, Guangxi University, Nanning, 530004, P.R. China 3. College of Agriculture, Guangxi University, Nanning,, 530004, P.R. China Corresponding author, chenyaoj@; Authors Abstract Cassava (Manihot esculenta Crantz) is an important food crop and energy plant. For transcriptomics and proteomics analyses of cassava, a study of methodology for preparation of high-quality total RNA and protein from tissues of root, stem, and leaf of cassava variety Huanan 124 at the root bulki