热休克蛋白质dnak 的纯化及其二聚体性质研究 - 天津科技大学学报.pdf

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热休克蛋白质dnak 的纯化及其二聚体性质研究 - 天津科技大学学报

第 31 卷 第 3 期 天津科技大学学报 Vol. 31 No. 3 2016 年 6 月 Journal of Tianjin University of Science Technology Jun. 2016 DOI:10.13364/j.issn.1672-6510 热休克蛋白质 DnaK 的纯化及其二聚体性质研究 1, 2 1 1 1 1, 2 1, 3 刘清岱 ,苏家跃 ,田雪利 ,杨 营 ,赵 飞 ,盛长忠 (1. 天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津 300457 ;2. 天津天隆种业科技有限公司,天津 300457 ; 3. 丹娜 (天津)生物科技有限公司,天津 300457) 摘 要 :通过定点突变技术构建了两个 DnaK 蛋白质突变体 ,研究腺嘌呤核苷三磷酸 (ATP)和腺苷二磷酸 (ADP)条 对热休克蛋白质 DnaK 二聚体性质的影响.首先诱导表达 DnaK 蛋白质的两个突变体 DnaK-A303C 和 DnaK-H541C , 并采用硫酸镍亲和层析和阴离子交换层析对重组蛋白质进行纯化.对等量的 DnaK 蛋白质进行氧化交联处理 ,然后采 用聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS)检测 ATP 、ADP 对 DnaK 二聚体的影响.研究表明 DnaK 突变体在 ADP 的存在下 以同二聚体的形式存在,但是在 ATP 条件下能够形成异二聚体.由此为深入认识热休克蛋白质两个亚基之间的协同作 用提供了实验依据. 关键词 :DnaK ;ATP ;二聚体;突变体 中图分类号:TS201 文献标志码 :A 文章编号 :1672-6510 (2016)03-0011-05 Purification of DnaK Mutants and the Characteristics of DnaK Dimer 1, 2 1 1 1 1, 2 1, 3 LIU Qingdai ,SU Jiayue ,TIAN Xueli ,YANG Ying ,ZHAO Fei ,SHENG Changzhong (1.College of Food Engineering and Biotechnology ,Tianjin University of Science Technology ,Tianjin 300457 ,China ; 2.Tianjin Tianlong Seeds Science and Technology Co. ,Ltd ,Tianjin 300457 ,China ;

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