小鼠胚胎成纤维细胞条件培养液的蛋白质组学初步分析 - 中南大学学报 .pdf

( ) 中南大学学报 医学版 　2005, 30 ( 1) ( ) J Cen t S ou th Un iv M ed S ci 11 小鼠胚胎成纤维细胞条件培养液的蛋白质组学初步分析 石 　敏 ,谢常青 ,卢光 (中南大学生殖与干细胞工程研究所 , 长沙 4 10078) [摘要 ] 　目的:运用双向电泳 、质谱技术对小鼠胚胎成纤维细胞饲养层条件培养液进行蛋白质组学分析 ,寻找 60 γ 其中可能具有抑制分化作用的蛋白因子 。方法 :用 Co 射线照射昆明白小鼠胚胎成纤维细胞 ,制成饲养层 ,置于 ( ) ITS 胰岛素 转铁蛋白硒钠盐 培养液中培养 24 h,收集条件培养液 。用冷冻干燥 、凝胶过滤层析 、冷丙酮沉淀的方 法从条件培养液中提取蛋白质样品 ,经双向电泳和银染得到双向电泳图谱 ,用 Im age m aster elite 2. 0 软件进行图像 分析 。取蛋白点进行酶解 ,再用 CapLCESIQ TOF质谱进行分析 ,使用 M a scot软件在 NCB Inr数据库中进行有哪些信誉好的足球投注网站 。 ( ) 结果 :双向电泳得到 22 1 ±67 个蛋白点的银染图谱 ,初步分析鉴定 13个蛋白点 。结论 : 昆明白小鼠胚胎成纤维细 β ( ) 胞条件培养液中含有 半乳糖苷结合蛋白、半胱氨酸富集的酸性分泌蛋白 SPARC 等成分 。 [关键词 ] 　小鼠胚胎成纤维细胞 ; 　饲养层 ; 　条件培养液 ; 　双向电泳 ; 　质谱技术; 　干细胞分化抑制因子 [中图分类号 ] 　Q50; Q51　　　　[文献标识码 ] 　A 　　　　[文章编号 ] (2005) 0 1001105 Prelim inary proteom e ana ly sis of m ouse em bryon ic f ibrobla st cond itioned m ed ium SH IM in , X IE Changq ing, LU Guangxiu (R ep roduction and S tem Cell E ng ineering Institu te, Cen tra l S ou th Un iversity, Changsha 4 10078, Ch ina) A b stract: 　O bjective 　To p erform the p roteom e analys