离子交换层析复性重组人y一干扰素折叠二聚体的形成.pdf

浙江大学学报(农业与生命科学版)32(1)：101～105，2006 Journalof LifeSci．) ZhejiangUniversity(Agric．8L 文章编号：1008-9209(2006)01一0101一05 离子交换层析复性重组人Y一干扰素折叠二聚体的形成 靳挺1’2，关怡新1，姚善泾1 (1．浙江大学化学工程与生物工程学系，浙江杭州310027；2．浙江大学宁波理工学院生物与化学工程分院，浙江宁波315100) Fast 摘要：SPSepharoseFlow离子交换层析柱作为蛋白质复性系统，采用尿素梯度法进行重组人r 干扰素包涵体蛋白质的复性实验．结果表明，尿素梯度离子交换层析法能有效地复性重组人r干扰素 包涵体，复性后的重组人r干扰素的纯度迭95％，蛋白收率达54％，比活为7．5×105 IU．mg～．以 Superdex75凝胶作为体积排阻层析介质，对离子交换层析复性的样品进行分析，表明离子交换层析复 性的样品中没有重组人r干扰素聚集体存在．荧光光谱分析表明重折叠的重组人r干扰素的构象接近 于其天然二聚体构象． 关键词：重组人r干扰素；包涵体；复性；离子交换层析；荧光光谱分析 中图分类号：Q511 文献标识码：A JIN Yi—xinl，YAO ChemicalandBiochemical Tin91一，GUAN Shan-jin91(j．Departmentof 310027， Biochemical Engineering，ZhejiangUniversity，HangzhouChina；2．Collegeof Institute 315100，China) Engineering，NingboofTechnology，Zh巧iangUniversity，Ningbo Formationofdimersin ofrecombinanthuman refolding interferon-yion-exchange by chromatography． of JournalZhejiangUniversity(Agric．＆LifeSci．)，2006，32(1)：101-105 Abstract：The was theconcentrationofureainthe refoldingprocessperformedbygraduallydecreasing after buffer thedenaturedrhIFN一7 hadbeenboundontothe SP Fast proteins ion-exchangegel Sepharose Flow．Resultsshowedthatthedenatured wasrefolded rhIFN一_y efficientlybyion-exchange withaurea andthe oftherefolded wasto chromatographygradient purity rhlFN-yup 95％．The protein was54％