第八篇基因概念的发展.ppt

第八章 基因概念的发展 一、基因和DNA 1、测序： （1）、化学降解法 美国A.Maxam 和W.Gilbert发明 * * 标记 32P-TCAG 32P-TCAGCCCCATG 32P-TCAGCCCCATGG 32P-TCAGCCCCATGGTTAAG T处断裂 TCAGCCCCATGGTTAAGA-------单链DNA 32P-TCAGCCCCATGGTTAAGA 32P-T 32P-TCAGCCCCAT 32P-TCAGCCCCATGGT 32P-TCAGCCCCATGGTT 32P-TC 32P-TCAGC 32P-TCAGCC 32P-TCAGCCC 32P-TCAGCCCC 32P-TCAGCCCC 32P-TCA 32P-TCAGCCCCA 32P-TCAGCCCCATGGTTA 32P-TCAGCCCCATGGTTAA 32P-TCAGCCCCATGGTTAAGA A处断裂 C处断裂 G处断裂 T C A G 电泳 放射自显影 （2）双脱氧终止法（链终止法） （英）F.Sanger 和A.X .Coulson发明 C C C H CH O 四种碱基 H H H H -O-P-O-P-O-P-O-CH2 O- O- O- O O O 双脱氧核苷酸 DNA sequencing using the chain termination method. DNA sequencing gel showing the separation of fragments in the four sequencing reactions (one per lane). In DNA sequencing using dideoxynucleotides labeled with fluorescent dyes, all four ddNTPs are added to the same tube, and during primer extension, all combinations of chains are produced. 2、隔裂基因和重叠基因 　　 (1)、隔裂基因（split gene） 内含子(intron)　 外显子(exon) (2)重叠基因（overlapping genes） 1977, Sanger: ΦX174测序 ABCABCABCABCABCABCABC ……... 基因基本特性：①自体催化 　　　　　　　　　②异体催化 　　　　　　　　　 ③ 突变 通读框（open reading frame） 二、生化突变型与一基因一酶学说 1941 ，Beadle Tatum 提出： “ one gene one enzyme” hypothesis ↓ ↓ ↓ ↓ N- 乙酰 鸟氨酸 瓜氨酸 精氨 精氨酸 鸟氨酸 琥珀酸 氨甲酰磷酸 天冬氨酸 图：精氨酸生物合成途径 乙酰鸟 鸟氨酸精 精氨琥珀 精氨琥珀 氨酸酶 氨甲酰酶 酸合成酶 酸裂解酶 Beadle and Tatum: 一个基因 --- 一种酶 One Gene --- One Enzyme X rays MM CM MM Vitamins Amino acids Purines and pyrimidines X射线诱导处理红色面包霉，筛选出被诱导的突变体来进行实验。根据遗传分析和大量研究，他们认为基因发生突变，就可能导致酶活性的丧失。 红色链孢霉实验 (1) 突变品系 基本 基本培养基加 培养基 鸟氨酸 瓜氨酸 精氨酸 arg － －