关于大鼠膀胱及临床人膀胱癌组织细胞5-HT,2B受体表达的分析.pdfVIP

中文摘要 蒋 富n 瓣萋娶的生物胺。它在人体巾溉楚孛抠秘经递羧也是羚闵弼凄， 参与谗多重要戆黧理秘瘸理过程，嚣这些凌能都麓5一HT逸避怒 细胞表面相应的特异性受体结合实现的。到网前为止，在哺乳动 镪中憨发瑰14个5一HT受体(5一mR)艇型，7个亚家族，酃5一 舍力最高的囊麓。5一HT2。R在入的牵椴神经系统翻一些外周缀 缀巾均有表达，傻至今潞来觅该受律谯胯魄细胞裘迭豹相关撤道。 为探讨5一HT2。R在动物膀胱细胞有褥表达，我们应糯半定激RT 一咒致技术对正常大甄鳇膀麟组织进行?检溅。露嚣尊探讨了与5 一|j滢捧嚣莓美鹣楚物髋囊酮、褪黑激素耱右芬氟拉赣及致癌荆联 苯蔽对大鼠膀麟缨照5一HT2。R表达赫影镌。在就萋醚上，我船 还对临床膀胱癌瘸人的脞瘤组织及癜旁鼹磐缎织的5一HT：。R液 达求警进行了梭溅，观察了黪麟缨魏癌变时该受体表达水平的变 化，以了解膀赋癌的发生冬5一}f‰建是餐毫关。 实验榜耩舞方法 1。实验材料 4-10 1。1实验动物：雄性Wistar大鼠28、只，体重200 g。 1．2临床拣零：临床确诊为膀胱瘸的病人瘗缀织标本32份， 癌努最常膀虢缀织标本8份。 Mini 1．3主要药品及试剂：R_NeasyKit，oligo dT(16)，Nuclease ·王· 触ewater。RlNase DNA 缓{申漩(pH7。4)。 PeltlerThermal 恒温水温箱，PTC一200 及分摄系统。 2．实验方法 2．1实验动凌分组与药物处理：雄性Wistar太葳28是，隧撬 分为7组，每组4只。实验组分别用吡喹酮、褪黑激素、右芬氟拉 骧及联苯胺处理。用攘霜容爨的玉米油、垒理盐承及∞％乙酵泼 同样方式处理作为对照。给药2小时后处死大鼠，于无菌条件下 墩出膀胱，裁鍪成缨臆浓度为5×106令／ml鳇单个缨魏悬渡。 2．2临床标本处理：临床病人的膀胱瘸及癌旁正常膀胱组织 标本手零甥踩后迅速置于冰上带霹实验室。割备戎缨胞浓度为5 ×106个／Ⅱll的单个细胞悬液。 2+3骋胱缨缒总RNA掇取：取Iml黪赋缨胞单个续照悬滚， 按试剂盒说明提取总RNA。用UV300紫外分光光度计测定总 鞭A的纯度及浓度。 2．4 一actin基因。 2。5PCR扩增产物检测慧分耨：PCR扩增产物经琼l警糖攒胶 1D 软件系统进行分折。5一}琨。襞表达水平爨掰溅宠戆5一}％R扩 增产物的电泳条带密度与B—actin电泳条带密度的比值来表示。 10。0for 2。6缪澍攀处理：惩SPSS windows软佟对结果牵懿数 ·2· 据送行统计学赴理，实验数据以交±8表示，丽t检骏进行照著畿 分橱。 实验绪巢 实验动物膀胱缩臆5一}啦。R表达检测结果显示，实验组和 对照组大鼠膀麟缨煦均有5一HT2。R裘达。吼睦黎、褪罴激素糨 右芬氟拉髓处理缀的5一lrr2。R平均表达水平明最高于生理盐水 处理缀(翱正常对照缀)，吡囔瀚和右芬氟控爨处瑗缀与其溶裁缝 理组相比有显藩性差异，联苯胺处理组与其溶剂处理组相比未见 照萋性整异，玉米潮处理组与生理盐永处理组裙院有显著缝差筹， 20％乙醇处理组与生理盐水处理组相比未见显著性差异。 浆廉撂本膀就缨煦5一l强8R表达检测缭采显汞