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冷适应过程中柑桔钙信号变化的分析
缩略词表
缩略符号 中文解释
Probenecid 阴离子转运抑制剂
F.127 非离子去污剂
Ca-green/AM 一种酯形式的特异钙离子荧光染料
Ftuo.3|∞讽 一种酯形式的特异钙离子荧光染料
Fluo-4/AM 一种酯形式的特异钙离子荧光染料
LSCM 激光扫描共聚焦显微镜
BSA 牛血清白蛋白
CaM 钙调素
EM 电子显微镜
[Ca?+]川 胞质游离钙离子浓度
dT/dt 温度随时间的变化
EGTA 特异性钙离子螯合剂
冷适应过程中柑橘钙信号变化的研究
摘 要
柑橘是世界上重要的经济作物,办是我国南方的一种极为重要的果树。探讨柑
橘抗逆性的生理生化机理,进而提出抗性栽培的技术措施,增强抵御自然灾害的能
力,是提高我国柑橘产量、品质和经济效益的关键,具有重大的意义。Ca2+作为第
二信使在生物体内起着重要作用。而cal十信号对植物抗寒的作用大多数只是在一年
生草本植物上得到研究.而在多年生木本植物的研究上甚少。本研究以较抗寒的柑
reticulate
橘枳壳(Poncitrus Blanco)幼叶为材
trifoliata)和抗寒性较弱的桠柑(Citrus
料.用焦锑酸钙沉淀法对钙进行组织定位:以来檬fC
aurat(folia
Swingle)原生质体为
材料,用LSCM观测低温下钙定位和游离钙浓度变化。
Blanco.)和枳壳(户护帕liataR锄叶片钙的亚细胞定位的实验
1.在对槿柑(Creticulate
中,25℃下生长的幼苗,显示钙定位的焦锑酸钙沉淀主要分布于液泡、细胞间隙和
细胞壁中,而在胞质和叶绿体中分布较少,叶片在开始低温锻炼(4C)培养2h内,
细胞质、叶绿体的钙水平都升高,叶绿体中钙分布在片层结构上,而液泡中的钙水
平迅速降低。但在低温锻炼时间延长到48h后,细胞内的细胞质、叶绿体的钙水平
降低。在4℃低温下锻炼7d,细胞内钙又恢复到低温处理前的水平。
2.用Fluo--4/AM染色,测定静息态及连续降温条件下来檬(C.auratifolia
Swingle)原
生质体游离ca2+浓度的时空分布与动态变化。实验采用三种溶液系统:51.tmol/L的
EGTA的染色液.对照染色液。结果表明,对照染色液中温
A二3187染色液,2mmol/L
育的原生质体在LSCM下观察到,荧光位于细胞质内,在液泡中没有渗漏。A23Is7作
为ca2+载体,它可把钙从胞内钙库转移至细胞溶质中去提高了细胞溶质中游离C一+
的浓度。EGTA是特异性Ca2+螯合剂。经EGTA反应过的细胞内仅有微弱的荧光。
所以可以说明我们的实验体系确实能够反映Ca2+的变化.还从另~侧面说明了荧光
是Fluo--4与游离ca》是特异性结合产生的。同时,其静息态下
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