凋亡抑制因子survivin和缺氧诱导因子HIF-1a在卵巢癌发生、发展机理中的分析.pdfVIP

±查苎墨 J————_————————^————_——●————●_———___—_———-——_———一一一 一 ．一 疗和预后的评价提供理论依据。 材料与方法：(1)研究对象：卵巢肿瘤组织标本81例， 年龄17．60岁，平均年龄46．5±8．5岁，其中卵巢癌患者 49例(上皮性癌28例，生殖细胞肿瘤14例，性索间质肿 瘤7例)。按照1987年FIGO临床病例理分期标准进行分 期，其中I期11例，II期17例，III期19例，Ⅳ期2例： 卵巢良性肿瘤患者32例，(卵泡膜细胞瘤9例，囊性畸胎 瘤7例，粘液性囊腺瘤6例，浆液性囊腺瘤lO例)；正常 卵巢组织13例作为对照，年龄在30一55岁之间，平均年龄 44±8．2岁。(2)试剂：一抗为1：100浓度稀释的鼠抗人 度稀释的鼠抗人HIF—la(aa530．826)单克隆抗体(美国 NeoMarkers公司产品)；1：100浓度稀释的鼠抗人 acids CRUZ VEGF(amino1-140)单克隆抗体(美国SANTA 公司产品)。二抗为1：100浓度稀释的羊抗鼠FITC-IgG抗 Immuno 体(美国JacksonResearch公司产品)，。(3)方法： 应用流式细胞技术和间接免疫荧光的方法。分两部分进行， 第一部分为survivin、HIF一1Ⅱ、VEGF的检测：术中切取 卵巢组织后，制成蜡块，常规病理切片，HE染色，由有 经验的病理医师进行诊断核实。切取40．50微米厚的切片， 然后经过脱蜡、水化、制成单细胞悬液、离心、免疫荧光 染色等步骤后上机检测和在免疫荧光显微镜下观察。第二 部分为细胞凋亡(DNA含量)检测，术中切取的卵巢组织 于70％乙醇固定，然后制成单细胞悬液，在进行细胞DNA 的染色，上机检测。并计算荧光指数(FI)和细胞凋亡率(AP)， 进行统计学处理。 中文摘要 a及细胞凋亡率水平在不 结果：(1)survivin、I-IIF．1 同卵巢组织中的表达结果：survivin在卵巢癌组织中的高 表达(97％，48／49)，在卵巢良性肿瘤组织中低表达(25％， 8／32)，在卵巢正常组织中的不表达(0／13)(PO．01)。而 且survivin在卵巢癌组织的FI值明显高于卵巢良性肿瘤组 a在卵巢癌组织中表 织和卵巢正常组织，PO．01。HIF一1 达率为100％(49／49)，明显高于卵巢良性肿瘤组织37％ (12／32)，而在卵巢正常组织中不表达(0／13)，P0．01， a的表达量FI值与良性卵巢肿 同样，卵巢癌组织的HIF-1 瘤组织和卵巢正常组织相比差异显著，P0．01。三种卵巢 组织的凋亡细胞率的差别有统计显著性，P0．01，卵巢正 常组织中的细胞凋亡率最高，其次为卵巢良性肿瘤组织， 卵巢癌组织的最低。(2)survivin、HIF—IQ在不同临床分 期、分化程度、病理组织类型的卵巢癌组织中的表达结果： HIF-1 a在晚期(III、Ⅳ期)卵巢癌中的表达量明显高于早 期(I、II期)卵巢癌组织，P0．01；HIF—lⅡ的表达与 卵巢癌组织的分化程度和病理组织类型无关。survivin在 宫内膜样癌中的表达量明显高于恶性畸胎瘤、无性细胞瘤， P0．05，而与浆液性腺癌、粘液性腺癌无明显差异，P 0．05。Survivin的表达从卵巢癌I期到Ⅳ期呈升高的趋势， 但无统计学显著性。Survivin的表达与卵巢癌组织的分化 程度无关。(3)在卵巢癌组织中survivin、HIF．1a的蛋白 表达量与细胞凋亡率水平呈负相关，r0．479，r：．0．582， Q的表达量与VEGF的表达量呈 p0．01；survivin、HIF-1 Q 的蛋白表达量呈正相关，r=0．734，P0．01。