几丁质壳聚糖酶产生菌的分离及发酵条件、酶学性质分析.pdfVIP

塑坚查堂塑圭兰堡堕苎—— 几丁质／壳聚糖酶产生菌的分离及发酵 条件、酶学性质研究 摘 要 本实验室从浙江省滩涂淤泥筛选了一株既产几丁质酶又产壳聚糖酶的菌株 cJ．5，经鉴定属于气单胞菌属(彳Pr伽。腑s)。通过对爿盯鲫D船s sp．CJ一5发 酵条件的研究，确定其最佳产几丁质酶的条件为：培养温度30℃，pH7，几丁 质底物浓度2．5％，500mL摇瓶的培养基装量为loomL：最佳产壳聚糖酶的条 件为：培养温度30℃，pH6，壳聚糖底物浓度2．5％，摇瓶装量为125mL。在3 升发酵罐中以几丁质为底物进行发酵，几丁质酶活力可达O，4lU／mL，壳聚糖酶 活为1．5u／mL。通过对硫酸铵沉淀获得的粗酶进行酶学性质研究，发现该菌产 生的几丁质酶与壳聚糖酶的最适反应温度为36℃与56℃，其最适反应pH都为 7．O。两种酶在50℃以上的温度条件下容易失活。通过非变性电泳和SDS—PAGE 的分析，确定了该菌产生的几丁质酶的分子量为250 kD，壳聚糖酶的分子量为 50kD。通过以几丁质为底物的发酵液试验表明，发酵液具有明显的抑制真菌以 及促进水稻生长的作用。 关键词：气单胞菌 几丁质酶 壳聚糖酶 几丁寡糖 壳寡糖 SDS—PAGE 薄层层析 抑菌作用 …。—— 一一 塑坚盔堂堕主堂垡丝兰 。 ——__—m__——__^nH——————__-—_—————_’___————-___—————-____——————一一一 and Chitinase both IsOlation Producing of月秽，口J押D抛船sp．CJ一5 aswell oftheFermentation Chitos矗n趣sea嚣Analysis Co鞋di毫耋。珏盛珏d E硅zyl硅eproper哆 Abs扭鑫蘸 As辖ain b确ehitin8se鑫ndc撼tos越遗辩was C孓5掰喇ucing isol珏ted{}。狲so玎 of wasidentified ZhejiangproVince．It as“P，o，”D抑舢sp．．The s龇nples optimal 受鞋ne】lt畦i0鲢。则畦On宜室ej-5 s{r曩i髓t0∞dueee}澈lH是塞e弭as南e两8捻遗in曩a漆；王蘸 20％medium(injtial thatof pH7．O)containing 30℃，谢m 2。5％(w／v)chitin，while chitos嬲蹒霉嬲in张幻耱d p扮如ci珏g