抗CD20单克隆抗体联合CHOP化疗方案治疗人B细胞淋巴瘤的实验分析.pdfVIP

第二军医大学硕士论文 中文摘要 抗CD20单克隆抗体联合CHOP化疗方案 治疗人B细胞淋巴瘤的实验研究 摘要：非霍奇金淋巴瘤(NHL)是临床常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡 率位居恶性肿瘤第五位¨大多数NHL起源于B淋巴细胞，95％以上的B细胞NHL 表达CD20抗原。NHL对常规放疗和化疗，一般较敏感，但治疗后复发率也高， 一旦复发，再次治疗缓解率低，缓解持续时间短，且由于上述治疗方法毒副反应 大，患者常常不能耐受，尤其老年或合并其他疾病患者。因此，寻找一种新的有 效的治疗药物和策略十分必要。 CD20抗原仅表达于所有的前B和成熟B细胞，而不表达于造血干细胞、浆 细胞和其他造血细胞系，同时CD20在超过90％的B细胞性NHL中均有表达，且 抗原不会脱落，也不会因与抗体的结合发生抗原调变，因此CD20抗原是单克隆 抗体治疗的一个理想的靶抗原，国外已经成功地开发了多种抗CD20的鼠源性， 嵌合型及人源化抗体，其中一种嵌合抗体已经成功上市，另有多种处于实验阶段。 抗CD20单克隆抗体成为治疗NHL一种有效的治疗手段。 本实验旨在建立评价抗CD20单克隆抗体体内，体外活性，以及研究抗体联 合化疗治疗新方案的实验模型，为今后新的抗CD20单克隆抗体及治疗方案的有 效性提供评价体系。 本实验主要包括以下内容： 人B细胞淋巴瘤裸鼠皮下移植模型建立： 细胞，细胞最佳数量为3×107个。成瘤时间为7一14天。病理检查：裸鼠体内各 主要脏器均正常，未见肿瘤转移。镜下：呈人B细胞淋巴瘤形态。免疫组织化学 检查：可见鼠抗人CD20单抗同人鼠嵌合CD20抗体都能同肿瘤表面CD20抗原特 异性结合。常规染色体标本见着丝粒带型与人染色体一致。证明为人B淋巴瘤特 征。 鼠抗人CD20单抗及人鼠嵌合型CD20抗体联合CHOP方案治疗人B细胞淋巴 瘤： 体内试验：待皮下肿瘤生长至直径0．3cm后，即移植后第四天，随机分为5 第二军医大学硕士论文 中文摘要 组，每组10只，分别为对照组，化疗组，鼠抗人单抗治疗组，嵌合型抗体治疗 纽，嵌合型抗体联合化疗治疗组。开始治疗后隔2目测量肿瘤大小，结果显示： 联合治疗组效果最佳，化疗组优于嵌合抗体组及鼠抗人单抗组。裸鼠死亡后，鼠 抗人CD20单抗及嵌合CD20抗体治疗组裸鼠肿瘤组织石蜡包埋切片HE染色及 TUNEL法可见两组均出现大量凋亡。裸鼠体重数据分析，化疗组及联合治疗组体 重下降明显，与其他组相比具有统计学差别，表明化疗副作用较大，可使裸鼠体 重明显减轻。 ． 体外试验：用非同位素细胞增殖试验试剂盒检测对RMI细胞株体外杀伤作 用并绘制剂量反应曲线。鼠抗人CD20单克隆抗体及嵌合型CD20抗体均可增加 RMI细胞对化疗药物细胞毒性的敏感性。据以上实验可以获得如下结果：鼠抗 以通过补体依赖性细胞毒性(CDC)舜口抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)的 作用机制发挥抗肿瘤效应Ⅲ；还可增加药物抵抗性的人B淋巴瘤细胞对一些化疗 药物细胞毒性的敏感性，与常规化疗具有协同抗肿瘤作用，且毒副作用明显降低。 另外我们的研究还发现抗CD20抗体与抗原结合后能够促进肿瘤细胞的凋亡。本 实验建立了肿瘤大小均一，生长速度相同的人B细胞淋巴瘤动物移植模型，与以 往国内外报道相比，该模型更为简单，不同动物问个体差异小，是研究抗CD20 单抗疗法的良好模型。 关键词：抗CD20单克隆抗体；人B细胞淋巴瘤；化学治疗； -2． 第二军医大学硕士论文 abstract ofHumanB-cell withCD20 ExperimentalTherapy Lymphomas Monoclonaland Antibody Abstract：Theincidenceof