抗生素产生菌AP19-1的鉴定及UV诱变育种的分析.pdfVIP

塑鋈盔堂堡皇兰垡堡窒—— 抗生素产生菌APl9—1的鉴定及Uv诱变育种的研究 摘 要 本文以一株抗生素产生菌APl9．1为出发菌株，对其进行了系统分类学以及 UV诱变育种的研究。 rDNA核苷酸序列分析表明，菌株APl9．1 形态学特征、生理生化性状和16S 属于链霉菌属(勋印向彤，甜ssB)。 用紫外线对APl9．1的孢子及原生质体分别进行诱变育种，获得了产抗生素 的高产菌株。经纸片法和最小抑菌浓度(MIC)测定，其中一株由原生质体诱变 得到的菌株，其发酵液中抗生素的相对效价是原始菌株的4倍，且有较高的遗传 稳定性。实验结果表明，原生质体的紫外诱变比孢子的紫外诱变更易得到抗生素 相对效价提高较多的突变株。 我们同时还研究了不同的培养温度对孢子的紫外诱变正向突变率的影响。将 UV诱变后的APl9．1孢子，分别置于适宜的生长温度27℃与接近抑制生长的胁 迫温度33℃下培养，结果表明：在33℃下培养获得的子代菌株中，产抗生素水 平超过其出发菌株的正向突变体所占的比例，明显高于在27℃下培养的结果。 27℃下培养，正向突变体占总子代菌株数的百分率为25．8％，而在33℃下培养则 为58．1％。用17种10bp的随机引物对出发菌株与UV诱变后的子代菌株进行总 DNA的RAPD测验证明，在接近抑制生长的胁迫温度33℃下培养获得的子代， 发生在其DNA水平上的变异程度要比在27℃培养下的子代高得多，与对照菌株 地提高了链霉菌APl9-l紫外诱变育种的工作效率。同时也为链霉菌紫外诱变后 突变形成机制的进一步研究提供了新途径。 关键词：抗生素，链霉菌，诱变育种，正向突变率，RAPD，16srDNA 系统发育分析 浙江人学倾I：学位论史 UV and on Studies Mutagenicbreeding an of strainAPl9—1 antibiotic—producing Abstract StudiesonUV and identincationof mutagenicbreeding an were strainAPl9．1 caⅡiedOut． me BaSedon resunsof characteristics6S phenotypic aIld1 rDNA sequence isoIate to analysis，nle me w笛弱signed genus脚r0删阳Ps． mordert0 trait improVe ofs仃ain its APl9-l，we me删biotic·producing exposed aIld toUVaIldisolatedamutant