抗氧化剂对大鼠肺纤维化的影响及机制分析.pdfVIP

上海第二医科大学99级博士研究生论文 抗氧化剂对大鼠肺纤维化的影响及机制研究 中文摘要 (肺纤维化是一种进展性、致死性肺部疾病，以成纤维细胞增生和 细胞外基质重构为特点，最终导致肺部结构不可逆的破坏。尽管其发病 机制目前尚不清楚，但多数认为首先由一炎症过程促发，造成肺损伤， 激活肺部致纤维化机制，形成终末纤维化斑痕。一些证据表明肺纤维化 的早期阶段以炎症为主，而且与纤维化的进展有关。，，疾病早期各种炎症 细胞进入肺组织，主要包括巨噬细胞、多形核白细胞、淋巴细胞和嗜酸 性粒细胞。这些细胞与肺部激活的常驻细胞一起释放多肽介质或细胞因 子，促进成纤维细胞增生并促进细胞外基质的合成。关键的细胞因子包 活性氧代谢也在肺部炎症过程中起重要作用。旧前肺纤维化的治疗主要 是糖皮质激素和免疫抑制剂，5年生存率仅为50％。由于肺纤维化预后 较差，疗效差，长期用药副作用严重，因此寻找新的治疗方法成为目前 关注的焦点。．1 ／ N一乙酰半胱氨酸(NAC)，乙酰化的半胱氨酸，是一种富含一sH的化 合物，进入机体后代谢，能激活谷光甘肽的合成，促进解毒作用，并可 以直接作为自由基清除剂，清除过氧化氢、超氧阴离子、羟自由基和次 氯酸。／NAC是传统的化痰药，用于治疗多种肺部疾病，但在谷光甘肽减 少或氧化加强的疾病中，如HIV感染、肿瘤和ARDS，NAC同样表现出 疗效。健康的肺组织中氧化过程由抗局部的抗氧化机制平衡。但氧化负 担增加或抗氧化能力下降都会打破这种生理平衡，导致肺损伤珈市纤维 化过程中肺组织谷光甘肽含量较低，炎性细胞聚集氧代谢产物增多。提 示加强抗氧化剂对肺的保护可防止氧自由基介导的组织损伤。 博莱霉素是～种作用于DNA的抗肿瘤药，常用于研究弥漫性肺纤 维化的发病机制。博莱霉素所导致不同种属肺部的生化和形态变化与人 ， 类相似。我们用博莱霉素诱导大鼠造成肺纤维化动物模型。f本实验采用 ＼ 上海第二医科大学99级博士研究生论文 气管内滴注博莱霉素处理46只雌性SD大鼠。对照组40只大鼠同样方 法气管内滴注生理盐水0．2mL。分别在第3、7、14和28天处死动物前 进行HRCT扫描和肺泡灌洗。每次10只动物，分别进行组织学、肺泡灌 洗掖和HRCT的评价。肺组织浸于10％福尔马林溶液，组织切片H．E和 结构正常。肺泡间隔和胸膜较薄，肺泡壁呈细鱼网状。肺泡间隔见极少 量胶原纤维、少量单核细胞，无炎性细胞浸润。博莱霉素模型组双肺出 现由肺泡炎逐渐向间质紊乱、纤维化过渡的病变。开始时肺泡壁水肿、 肺泡间隔增宽伴炎细胞浸润。第14天-28天时，见成纤维细胞明显增 多，胸膜局灶性增厚，肺泡结构紊乱，间质和肺泡腔内胶原沉着。对照 组肺泡灌洗液细胞数为106个，主要为巨噬细胞。博莱霉素组在第3、7 天和14天细胞总数明显增加(P0．05)，第3天和7天中性粒细胞数明 显增加(PO．05)，到第28天趋于正常。嗜酸性粒细胞及淋巴细胞在第 同时有增加。肺纤维化HRCT可表现为蜂窝肺、胸膜下小囊腔、小结节 灶、密度较高的纤维条索影及毛玻璃影。HRCT半定量评估肺纤维化程 度与病理半定量分级呈良好的相关性蕻验提示肺纤维化的严重程度可 由HRcT半定量评级来评估并监测。该实验模型包括了初始肺泡炎和晚 期纤维化的病理过程，为进一步研究肺纤维化致病机制和治疗提供了方 便。 I 第二部分实验探讨NAC对博莱霉索致大鼠肺纤维化的影响。180只 大鼠由博莱霉素诱发肺纤维化，分为BLM组、NAc治疗组和DEX治疗组。 治疗最长持续28天。另一组接受隔日一次腹腔注射DEXI．6mg／kg，同 样治疗28天。分别于第3、7、14和28天处死动物，后将病理切片进 行计算机图象分析并测肺组织羟脯氨酸含量。实验第28天博莱霉素组 治疗减少19．77％。两治疗组之间无显著差异。计算机图象分析显示在 上海第二医科大学99级博士研究生论文 模型组有缓解。在第3天和第7天NAC和DEX治疗组还能减轻肺泡炎。