拮抗番茄青枯病内生细菌的定殖与控病作用分析.pdfVIP

拮抗番茄青枯病内生细菌的定埴与控病作用研究 摘 要 et 番茄青枯病(Ralstonia a1)是一类危害严重 solanacearum(smith)Yabuuchi 的世界性病害。由于其可经土壤传播并在维管束中危害寄主，防治起来十分困 难。植物内生细菌作为病害的生防菌具有一定的优势。才卿究从番茄内生细菌中 。 寻找青枯菌的生防菌，并进一步明确了其定殖情况及控病作用。 1．采用表面消毒研磨分离的方法，从健康番茄“合作903”品种根系内获得细 ／ 菌分离物239个。l室内平板喷雾法拮抗试验表明，18个菌株在PSA平板上可明 ＼ 显抑制膏枯菌Bs01-05的生长，这18个菌株中仅7株可在NA平板上表现对 Bs01．05的拮抗。各菌株在平板上形成的抑菌带宽和透明度存在差异。01—144、 、 一、 。 2．采用番茄“合作903”品种对这18株平板拮抗菌进行温室盆栽控病试 验。／最终有2株(01．144、01．182)能够表现较好的控病效果，两次重复试验二 ( ? 。。 者防效(25 d)均在40*／一50％。，y—丫7 ’t 3．对01．144菌株成功进行了抗药性标记。f通过逐步提高药物浓度的方法，获 { u p K。 得其抗链霉素200g·mLl和利福平100g·mL。1的自发突变株，记为01．144 01．144。在NA及PSA上连续转代20次，仍具稳定的抗药性状，且其在平板及盆 栽条件下仍具对Bs01．05的拮抗性状，可以作为01．144的标记菌株进行定殖研 究。k～ 4．在01．144‘的定殖试验中，所用番茄品种、土壤和番茄育苗管理方式均与 01．144‘的浸种浓度约为2×109 盆栽控病测试中保持一致。f cfu．mL一，灌根浓度 ～ 约为6×108cfu·mL～。结果表明： ①01．144‘菌液浸种或灌根处理番茄，均可使其定殖于根表、根内、茎内、 子叶及真叶组织内，并在一定时间内其可维持相当数量。因此，01．144具有良好 的宿主体内定殖与转导能力。验证了其内生性。 ②菌液浸种、直接灌菌或伤根灌菌三种方式处理番茄后，01．144‘在根、茎 内均有一个“由升到降”的数量变动趋势。从数量上看，根内茎内，而茎下部 茎上部；从数量变动幅度上看，根内茎内，茎下部茎上部。因而，01—144“ 在番茄根内具较强而稳定的定殖能力，茎下部次之，茎上部最差。伤根灌菌与直 拮执|茹青枯病内生细菌的定疰与控病作甬研究 接灌菌处理的试验结果显示，伤根仅能在灌菌后初期使01．144‘在各组织中的数 量高于未伤根处理。因而，伤根灌菌不能作为增加植株体内拮抗菌数量的有效途 径。 ③菌液浸种及后期(20d、30d)2次直接灌菌处理表明，每次灌菌后均可明 显增加01—144。在根、茎下部及茎上部组织内的定殖数量。适时灌菌可作为补充 植株体内拮抗菌数量的途径。 5．01—144菌株不同施用方式盆栽控病比较试验表明，仅菌液(约2x109efu ·mL。)浸种处理不能表现控病效果：接病原前(2 灌根处理可起到明显的控病效果，防效可达40％左右；首次灌菌及lOd后再次灌 菌可明显提高控病效果，防效在60％左右。 菌(Bacillussubtilis)。＼