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实验中常用的一些基本的实验方法和技术
1.一些常见的实验方法
⑴、根据颜色来确定某种物质的存在:
淀粉+I2(蓝色);还原性糖+斐林试剂(砖红色); 脂肪+苏丹Ⅲ(橘黄)或+苏丹Ⅳ(红色);
蛋白质+双缩脲试剂(紫色); 大肠杆菌+伊红和美蓝(菌落为深紫色,有金属光泽)
⑵、用颜色标记法来确定原肠胚三个胚层的分化情况。
⑶、用荧光标记法来证明细胞膜具有一定的流动性
⑷、同位素示踪法:光合作用产生氧气的来源;
噬菌体侵染细菌实验证明DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质; DNA的复制是半保留复制; 用18O2和14CO2追踪光合作用中氧原子和碳原子转移途径的实验等。
⑸、确定某种元素为植物必需的元素方法: 水培法(完全培养液与缺素完全培养液对照)
⑹、获得无籽果实的方法: 用适宜浓度的生长素处理花蕾期已去雄的子房,如无籽蕃茄、 诱导染色体变异,如无籽西瓜。
⑺、确定某种激素功能的方法: 饲喂法,切除注射法,阉割移植法,切除口服法。
⑻、确定传入、传出神经的功能: 刺激+观察效应器的反应或测定神经上的电位变化。
⑼、植物杂交的方法 雌雄同花:花蕾期去雄+套袋 +开花期人工授粉+套袋
雌雄异花:花蕾期雌花套袋+开花期人工授粉+套袋
⑽、确定某一显性个体基因型的方法: 测交; 该显性个体自交。
⑾、确定某一性状为显性性状或隐性性状的方法: 具有一对相对性状的纯合体的杂交
自交,观察后代是否有性状分离。
⑿、确定某一个体是否具有抗性基因的方法: 确定小麦是否具有抗锈病基因,用锈菌去侵染,一段时间后,观察有无锈斑 出现。
⒀、鉴定血型的方法: 用标准血清与待测血型混合,在显微镜下观察血液的凝集情况。
⒁、育种的方法: 杂交育种;人工诱变育种;多倍体育种;单倍体育种;基因工程育种;细胞工程育种
⒂、测定种群密度的方法:样方法; 标志重捕法
⒃、生态瓶的制作方法。
⒄、分离微生物的方法: 平板划线法;用选择培养基培养(如:圆褐固氮菌的分离,金黄色葡萄球菌的 分离,细菌和酵母菌的分离)
⒅、测定微生物群体生长的方法: 测定细菌的数目---显微计数 测定细菌的重量---取一定体积的培养基,经离心分离,反复洗涤后,称湿. 或烘干后称干重。
(19)等组实验法,如小麦淀粉酶催化淀粉水解的实验,发现生长素的燕麦胚芽鞘实验
(20)加法创意法,如用饲喂法研究甲状腺激素,用注射法研究动物胰岛素和生长激素,用移植法研究性激素等。
(21)减法创意法,如用阉割法、摘除法研究性激素、甲状腺激素和生长激素的实验,雌蕊受粉后除去正在发育着的种子等。
(22)化学分析法,如番茄和对Ca和Si选择吸收,叶绿体中色素的提取和分离实验等。
(23)理论分析法,如大、小两种草履虫竞争的实验,植物根向地生长、茎背地生长的实验,植物向光性实验等。
(24)模拟实验法,如渗透作用的实验装置,分离定律的模拟实验等。
上述内容基本上可以包括一般的实验方法,通过这次复习理解了这些方法,将有助于认识、分析和设计新的实验内容。此外,上述多数的实验方法有一个共同的特点:就是实验结论的得出,都是一个逻辑推理的过程,或者说都是一个透过现象看到本质的思维推理的过程。因此,在复习中要充分体会和体验这种过程。可以说,构建实验的方法体系,为分析、解决、设计新的实验,以及形成实验能力,奠定了良好的方法基础和思维基础。
2.常用技术手段
(1)关于光学显微镜的使用:
显微镜的取送:①右手握镜臂;②左手托镜座;③置于胸前。
显微镜的旋转:①镜筒朝前,镜臂朝后;②置于观察者座位前的桌子上,偏向身体左侧,便于左眼向目镜内观察;③置于桌子内侧,距桌沿5cm左右。
对光:①转动粗准焦螺旋,使镜筒徐徐上升,然后转动转换器,使低倍物镜对准通光孔;②用手指转动遮光器(或片状光圈),使最大光圈对准通光孔,左眼向目镜内注视,同时转动反光镜,使其朝向光源,使视野内亮度均匀合适。
低倍物镜的使用:①用手转动粗准焦螺旋,使镜筒徐徐下降,同时两眼从侧面注视物镜镜头,当物镜镜头与载物台的玻片相距2~3mm时停止。②用左眼向目镜内注视(注意右眼应该同时睁着),并转动粗准焦螺旋,使镜筒徐徐上升,直到看清物象为止。如果不清楚,可调节细准焦螺旋,至清楚为止。
高倍物镜的使用:使用高倍物镜之前,必须先用低倍物镜找到观察的物象,并调到视野的正中央,然后转动转换器再换高倍镜。换用高倍镜后,视野内亮度变暗,因此一般选用较大的光圈并使用反光镜的凹面,然后调节细准焦螺旋。观看的物体数目变少,但是体积变大。
反光镜的使用:反光镜通常与遮光器(或光圈)配合使用,以调节视野内的亮度。反光镜有平面和凹面。对光时,如果视野光线太强,则使用反光镜的平面,如果光线仍旧太强,则同时使用较小的光圈;反之,如果视野内光线较弱,则使用较大的光圈或使用
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