电化学发光免疫分析方法及其在医学中的应用分析.pdfVIP

中文捕蔓 中文摘要 I电化学发光免疫分析(丑(=LIA)方法作为一种新型的标记免疫学方法，具有灵敏 L—土 度高、选择性好的优点，已经越来越受到人们的关注。国外有几个研究组在从事这种 方法的开发和应用，并有公司生产了—套完整的仪器，但售价昂贵。而国内对电化学 发光免疫分析的研究少见报道，所以本论文在充分调研国际、国内有关电化学发光分 析研究、电化学发光免疫分析研究的历史和进展的前提下，在如何提高电化学发光效 率和发光检涌的灵敏度方面做了一定的改进，作为主要贡献者参与研制了—套高灵敏 度的电化学发光免疫分析仪器．并用自制的傥2S检测了人血清p53抗体的浓度，得到 了初步t引嘣}有意义的结果，证实了其用于临床诊断的可行性一’y ， 本工作首先参与研制了一台高灵敏度的电化学发光免疫分析仪。采用单光子计数 模块作为光子探测器，能够灵敏的检测光学信号；并在样品池的工作电极与探测器的 光电阴极之间用光纤束进行导光，避免工作电极下的磁铁对探测器的影响。 电极形状对电化学发光效率影响很大。对不同形状电极的电化学发光效率进行比 较，设计了圆片、四孔圆片和螺旋丝状三种不同形状的电极，对其电化学发光图像和 电化学发光强度进行捡测．结果发现电化学发光集中在电极的边缘，圜片电极检测 amol几， Ru(bpy)￡1：·6}lD的极限是1flaol／L，而四孔圆片电极检测的极5艮可以达到l 提高了3个数量级．由此得出结论，对于一定形状的电极，如果能做成筛嚼状的，也 就是最大限度的增加边缘的长度，同时也是提高了比表面积，就可以达到最大的发光 1：衄ol／L到l 效率。检测Ru(bpy)￡1。·6嘲}的线性范围可达到7个数量级，浓度从o．1 u∞l几，为定量检测提供了较竟的动态检测范曝． 电化学发光免疫分析实验中用到的发光标记探针一三联毗啶钉的复合物 跏僻ly矿一N}璐c鼬玎由本研究组自行合成．通过分析其红外光谤确定了该槐磺．又通 中文摘要 过其紫外一可见吸收光谱确定了其产率为752％． 把电化学发光免疫分析应用于肿瘤早期诊断，本文设计了一个新的肿瘤早期诊断 的方法，并从实验上证明了其可行性。用磁免疫电化学发光(I卜B吨)分析方法检溯 稀释于正常^血清中的极低浓度的p53抗体，并且做出标准曲线，然后定量分析了临 床诊断过的癌症病^血清中的p53抗体的浓度。结果显示，用本文设计的15I卜日CL检涌 分析方法检测肺癌血清的p53抗体阳性率为28．6％，鼻咽癌血清的p53抗体阳性率 非常低，为8．33％，都与前^．的报道相—致。分析结果发现，随着肺癌Il蠡J来分期的升 高，p53抗体浓度增加。 f总之，电化学发光免疫分析方法是—种简单、快速、灵敏度高的标记免疫学方法。 ——‘、 该方法可以定性或定量的分析临床样品，为临床检澍肿瘤标记物一p53抗体等提供了 一种新的分析方≤、／ 关键词： 电化学发光，免疫分析，三】撇钉， 电化学发光效率，p53抗体，血 清学检测 n aI删tag EleOmcbemiluminesomo=immunoassay但锄A)is andbetter sclcuivity． hasbeen哪the甜锄妇becauseof血cadvar妇gesofhi曲scnsi翻ty of beenatthework