益气解毒颗粒影响鼻咽癌细胞HNE1增殖和凋亡活性的实验分析.pdfVIP

中文摘要 目的：观察益气解毒方原方及拆方药物血清对人鼻咽癌细胞增殖活性和 凋亡活性的影响，从细胞凋亡诱导和增殖抑制效应角度探讨其抗肿瘤作用 的机制。 的增殖活性变化，流式细胞术检测其细胞凋亡活性和细胞周期效应，免疫 结果：原方组和解毒组分组药物血清作用在48h时细胞存活率最低， 细胞生长受到明显抑制，而益气组分组、养阴组分组、其它组分组药物血 清在作用72h时细胞存活率最低，细胞生长受到明显抑制。随药物血清浓 度的升高，细胞存活率进一步下降，提示药物血清对细胞增殖活性的抑制 效应具有浓度和时间双重依赖性特点(见图l、2、3)。 胞，无论血清是正常大鼠血清，还是胎牛血清，两者均能维持细胞生长， 相差显微镜下观察细胞形态未见明显差别和改变。并且在15％-@-清浓度下， 比较无明显差异P0．05(见表1)。 用同批灭活与未灭活的正常大鼠血清培养细胞，无论血清灭活与否均 能维持细胞生长，相差显微镜下观察细胞形态未见明显差别和改变。15％．u正- 表1)。 与原方组比较，解毒组分组15％药物血清对细胞增殖率的影响无明显差 分组、养阴组分组、其它组分组对细胞增殖率的影响有显著性差异，P0．01。 但益气组分组、养阴组分组、其它组分组三者之间对细胞增殖率的影响无 细胞的增殖抑制作用弱于原方组和解毒组分组。由上可知，各组15％药物 原方最为明显(见表1)。 照组高，s期和G：+S期细胞比例均低于对照组，作用24～48h，G。期细 h、48 h， G．期细胞比例低于 性PO．05；养阴组分组15％药物血清作用24 h、48 h， 对照组，差异有显著性P0．05，其它组分组15％药物血清作用24 P0．05，G：+s期细胞高于对照组，差异无显著性，P0．05，(见表2)。 对组内细胞周期分布情况进行比较，各组的G，期细胞比例均远高于G。+S 期细胞比例，同时，S期细胞比例也远高于G。期细胞比例(见表2)。 与对照组相比，原方组和益气组分组15％药物血清在24h、48 数高于对照组。与对照组相比，解毒组分组、养阴组分组、其它组分组15％ 药物血清在48 h凋亡指 但三者凋亡指数低于对照组。对各组内15％药物血清作用24h、48 数进行比较，发现15％药物血清作用24h、48 指数均有一定程度的升高(见表3)。 h、36h、48 各组15％药物血清分别作用24 的延长而呈进一步降低趋势。作用24h的PCNA显色最深，作用36h的显 色居中，作用48h的显色最浅。各组15％药物血清作用24 h、48 胞的P53显色结果均较对照组深，而在作用36 h后，则其活性表达 胞，并以原方组和解毒组分组更为明显。在原方组、益气组分组当药物血 清作用36h、48 养阴组分组和其它组分组，当药物血清作用36h、48 P。则呈较强程度的阳性表达。 用，尤以原方效应最为明显，且随着药物血清剂量的加大或培养时间的延 毒方原方组、益气组分组的15％药物血清均能诱导鼻咽癌细胞凋亡，而解毒 组分组、养阴组分组、其它组分的15％药物血清诱导细胞凋亡效应较低。 其中，原方组的细胞凋亡诱导作用最明显。但随着作用时间的相对延长， 各组分组的凋亡指数均显示不同程度的升高趋势。15％正常大鼠血清对细 的P53蛋白阳性表达率分别高于解毒组分组、养阴组分组、其它组分组。 (4)益气解毒方可能通过调控细胞基因表达模式而抑制鼻咽癌细胞的增殖， 诱导细胞凋亡。这可能是该方抗鼻咽癌的主要作用机理之一。其中，原方 诱导鼻咽癌细胞凋亡效应，与其益气组分的功效有密切关系。 凋亡诱导 An