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直肠癌远端肠管及直肠系膜切除范围的分析

中文摘要 目 的 及其意义,并以此评价直肠癌远端肠管的最佳切除范围。 活性,为手术切除一定范围内的直肠系膜提供理论依据。 方 法 1.组织标本的收集:收集本院肿瘤科2002年1月一7月间手术切除 的直肠癌新鲜标本共40例,所有标本均经病理学诊断证实。其中男性13 型29例。生长方式:团块状生长29例,巢状生长11例。病理类型:高分化 管状腺癌19例,中分化管状腺癌7例,低分化管状腺癌2例,乳头状腺癌9 例,粘液腺癌3例。浸润深度:粘膜层1例,肌层12例,浆膜下层25例,浸 透浆膜层2例。伴淋巴结转移者15例,无转移者25例。DukesA期9例,B 旁10em以远的正常肠组织做为阴性对照组。 2.检测样本的制备:手术切除标本离体后,即刻在肿瘤对侧沿肠管纵 轴剪开肠管,在无牵拉自然状态下用大头钉将肠管钉在纸板上,用标尺测量 长度并切取不同长度的组织。切取后的新鲜标本用眼科剪刀剪碎,细胞悬 mol/L 液经400目尼龙网过滤,O.01 PBS冲洗离心后调整细胞数为106个/ PI染色液(PI X~100 2mg,Triton (BD,1:20);或加入1.0mL 5mg,RNase 1 PBS mL,枸橼酸钠100mg,0.01mol/L 一7.6),4℃避光染色30rain;0.01mol/L PBS冲洗后上机检测。 3.流式细胞仪检测:流式细胞仪为FACScan(BectonDickinson), 200roW氩激光(488 nm),检测FITC绿色荧光信号,PI红色荧光信号,采集 10000个细胞,所测数据用Cellquest软件处理。 4.检测数据分析:以荧光指数(fluorescence 相对含量,公式为:FI=(癌组织CD44V6平均荧光强度一对照组平均荧光 2.0为阴性。以DNA指数(DNAindex,DI)判断DNA含量,用正常人体 ≠1.0 index,PI)和s期细 4-0.1为异倍体肿瘤。以增殖指数(proliferation fraction,SPF)反映细胞增殖活性。公式如下: 胞数(S—phase DI=(样品G。/G,期细胞DNA量平均值)/(标准二倍体DNA量平均值) PI=(s+G2M)期细胞数/(Go/GI+S+G2M)期细胞数 SPF=S期细胞数/(Go/Gl+S+G2M)期细胞数 10.0软件对计量资料进行方差分析及t检验, 5.统计学处理:用SPSS 计数资料采用X2检验。 结 果 于正常肠组织,5组间差异有显著性。 差异及两两比较均无显著性。 3.直肠癌组织中CD44V6阳性表达率与直肠癌浸润深度、淋巴结转移 及Dukes分期有关。 及正常肠组织;癌远端3—5cm、5cm直肠系膜中DI值显著高于癌组织及 正常肠组织。 性。 6.直肠癌组织中DNA异倍体与淋巴结转移及Dukes分期有关。 .’. 结 论 1.CD44V6与直肠癌局部浸润及转移扩散有关,可做为与直肠癌转移 相关的生物学指标。 的异常表达,提示手术远切缘,5cm比较安全。 癌进展程度。 上直肠系膜。。 关键词:直肠癌;癌远端肠管;远端直肠系膜;流式细胞术;CD44V6; DI;PI;SPF ·3· ofthe

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